动物组织核糖核酸的制备及测定2015/12/28

目的和要求1学习和掌握用苯酚法及盐溶液法从动物组织提取核酸的原理及操作技术。2练习从动物组织提取RNA，并鉴定纯度。实验原理利用苯酚法可以直接从动物组织中提取RNA，组织匀浆用苯酚处理并离心后，RNA...

紫外吸收法测定DNA含量2015/12/24

（一）原理组成核酸分子的碱基，均具有一定的吸收紫外线特性，zui大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的zui大吸收波长是260nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在波长260nm紫...

RNA的提取与核酸的颜色反应2015/12/21

一.目的学习用浓盐法从酵母中提取RNA掌握用等电点法沉淀RNA观察核酸的颜色反应，了解核酸定性与定量测定的原理熟练掌握普通离心机的使用方法二.原理酵母繁殖快，生长周期短；其细胞质中的核酸大部分是RNA...

如何进行扩增酶切片段多态性[AFLP]技术2015/12/16

扩增酶切片段多态性（AmplifiedRestrictionfragmentpolymorphism，AFLP）是由Zabeau等（1992）发明，并于1993年获得欧洲，该的权现在由荷兰Keygen...

反转录PCR2015/12/14

1原理RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法，主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR的模...

真核细胞总RNA的制备2015/11/30

从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离mRNA，cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上决定于RNA的质量...

基因组步行法扩增3’及5’侧翼序列2015/11/19

一．原理基因组步行技术是一种新发展的利用已知序列(cDNA或基因组DNA)从基因组中获得基因的上游(如启动子)或下游序列的方法。其原理如下：首先利用不同的具有平末端的DNA限制性内切酶消化基因组DNA...

注意事项：RNA抽提指南（TRIZOL）2015/11/12

注意事项：*全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。*使用灭菌的，一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA，避免使...

DNA的纯化浓缩与定量2015/11/3

实验目的将复杂的细胞分子混合物加入有机溶媒萃取以除去蛋白质及其它成分，就可以纯化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白质变性(denaturaion)的特性来进行萃取的...

[核酸抽提]mRNA的分离技巧2015/10/21

mRNA的分离与rRNA和tRNA不同的是，哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3"端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等...

支原体PCR检测实验报告2015/10/14

1.0物品、试剂：10ul及200ultip头、0.2mlPCR薄壁管、管架、手套；DEPC处理水、Ex-Taq试剂盒（包括PCRBuffer、MgCl2、Taq酶）、DNAmarker均另购，引物/...

PCR自动检测系统及其数据分析软件设计2015/9/23

摘要：本文简述了PCR基本原理以及模板扩增方法，介绍了pcr检测系统的整体构成，描述了信号检测的A/D接口电路，讨论了数据分析软件的设计原理，并对两种分析方法的特征和对结果的影响做了比较分析。关键字：...

PCR操作范例及反应体系的组成2015/9/18

CR反应条件不能产生所需的特异性产物，可采用新的寡核苷酸重新进行扩增，或用凝胶电泳来分离不同的PCR产物，而后再各自重新扩增进行序列分析。长度不同的片段可以用琼脂糖凝胶电泳来分离:1.片段大小在80-...

如何确定RNA质量的经验谈！2015/9/6

1）检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82....

NA干扰文库及其在功能基因组学研究中的应用2015/9/1

人类基因组大规模测序已经基本完成。但破解基因组的序列只是一个起点，目前多数基因的功能还不清楚，因此基因功能的研究是今后的发展趋势。传统研究基因功能的zui有效技术之一是细胞和小鼠的基因敲除技术。但该技...