免疫荧光技术之荧光显微镜检查方法2015/1/5

、荧光显微镜荧光显微镜是免疫荧光组织化学的基本工具，分透谢和落射二种类型，落射光无需镜内操作，方便、效果更好。它是由超高压光源、滤板系统（包括激发和压制滤板）和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的...

免疫磁性微珠分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞2014/12/29

材料及试剂1.磁性激活细胞分离器（MACS）：MACS柱（C型，可结合2×108个细胞）生物素标记的抗CD4单抗和抗CD8单抗2.生物素标记的羊抗鼠IgGF(Fab)23.FITC标记的亲和素4.生物...

细胞培养用途2014/12/22

细胞培养的用途包括：1、科学研究：药物研究开发与基础研究药物研究与开发（1）新药筛选：如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。（2）疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗、艾...

正常大鼠原代心肌细胞培养2014/12/4

正常大鼠原代心肌细胞培养一、实验试剂1、培养基：PriCellsMedium+10%FBS+1%P/S+PriCellsSupplement2、冻存液：PriCellsMedium+20%FBS+10...

人类外周血染色体制备2014/12/2

一、原理人外周血小淋巴细胞，通常都处在G1期（或G0期），一般情况下不进行分裂。如在培养液中加入植物血凝素（PHA），这种小淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞，进入有丝分裂。短期培养后，经秋水仙素处理...

外周血培养基配制2014/11/27

一、配制用水培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然...

细胞传代吹打减少气泡的方法2014/11/25

1.有一些细胞可以不用消化液就能够吹打下来。个人认为能不用消化液是的。譬如巨噬细胞。我一直维持巨噬细胞，每次传代都不用消化液，吹打的时候我一般会用瓶内未换的剩余旧培养液，这样子比用新的培养基可以减少点...

细胞凋亡检测-形态学2014/11/21

1、光学显微镜和倒置显微镜（1）未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2）染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡...

培养细胞的保存和复苏2014/11/19

做实验前要先学会冻存，以备自己在后面的实验中能保持同一来源、稳定可靠的细胞，且可减少污染或其它不利影响。1、影响冻存细胞活性的因素（1）细胞冻存保护剂：常用的有二甲基亚砜（DMSO）和甘油，常用的浓度...

肿瘤细胞培养2014/11/17

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是zui多的。另外肿瘤对人类是威胁zui大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其...

细胞培养污染的思考2014/11/17

污染是细胞培养技术中面临的主要问题。由每一种细胞有其*的培养体系，因此污染造成后果也不尽相同。某些污染的发生往往难以察觉检测，而且污染源能长期共存于培养体系中，这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细...

哺乳动物细胞表达系统及其研究进展2014/11/14

按照宿主细胞的类型，可将基因表达系统大致分为原核、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞表达系统。与其它系统相比，哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化...

肺泡上皮细胞的分离2014/11/13

1、取得*无血液残留的肺脏：实验前将大鼠全身血液放净，取得*无血液残留的肺脏。2、消化肺组织：常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是zui早用于消化、分离上皮细胞的酶，现在一般用...

毕氏酵母感受态细胞制备及转化2014/11/10

1、毕氏酵母氯化锂转化法（1）试剂1MLiCl（用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌；必要时用消毒去离子水稀释）50%PEG3350（SigmaP3640用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌，用较紧的盖子的瓶...

293细胞培养技术2014/11/5

1、293细胞明显适应酸性环境,pH值在6.9～7.1时,可顺利贴壁生长,换液时动作要轻。一般用高糖的DMEM培养基。2、传代：倒去废液，PBS洗一次（轻），用0.02%EDTA与0.25%Tryps...