SOC、TB、YPD培养基配制2016/7/18

SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中，再用...

DNA转化的要点及疑难解析2016/7/12

1、存放:超级感受态细胞必须从干冰运送包装箱取出直接放入–80°C冰箱的底部.一定不要用液氮来存感受态细胞.1)存放条件:超级感受态细胞对微小的温度改变也极度敏感,因此必须存放在–80°C冰箱的底部....

外源DNA和质粒载体的连接反应筛选与操作步骤2016/7/6

DNA克隆技术是70年代分子生物学发展的重大成果，用限制性内切酶直接切割分离某个外源DNA片段，与此同时用同一种限制性内切酶切割载体DNA，两个DNA产生同样的粘性末端，将它们混合后，二者的粘性末端通...

农杆菌感受态细胞的制备方法2016/7/4

农杆菌感受态细胞的制备1.挑取少许农杆菌LBA4404，接种于5mlLB液体培养基(含50mg/LSTR)中，28℃、200r/mim培养过夜。2.取2ml培养物于LB液体培养基(含50mg/LSTR...

从低熔点琼脂糖凝胶中回收DNA片段操作步骤2016/6/28

1、将已经电泳确定的可回收的酶切产物在合适浓度的回收用琼脂糖凝胶进行电泳。换用新的电泳缓冲液10×TAE(10×Tris-乙酸)。2、当溴酚蓝迁移至足够距离时(至少2cm以上)，在长波紫外灯下观察，用...

DNA指纹图谱分析原理与方法2016/6/22

一.实验目的1.掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2.学习DNA的限制性酶切的基本技术3.掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行...

利用碱裂解法提取与纯化质粒DNA2016/6/12

细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份，通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态，但在一定条件...

质粒DNA的小量快速提取2016/5/30

一、目的及要求。1、了解质粒作为载体在基因工程中的作用2、熟记提取质粒的基本原理，学习提取过程和方法3、为下一步实验提供高纯度的DNA样品二、原理：1、质粒（Plasmid）：独立于染色体以外的双链、...

DNA 序列分析技术2016/5/25

物种的遗传多样性在本质上是DNA一级序列的多样性。近年来，随着DNA测序技术的迅速发展和日益普及，DNA测序在遗传多样性的研究中正在起着越来越大的作用。本章将介绍目前在遗传多样性研究中常用的一种手动和...

PCR－RFLP分析技术2016/5/23

聚合酶链式反应（PCR）是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应，可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链；人...

核酸分离与纯化的原理及其方法学进展2016/5/16

核酸的分离与纯化技术是生物化学与分子生物学的一项基本技术。随着分子生物学技术广泛应用于生物学、医学及其相关等领域,核酸的分离与纯化技术也得到进一步发展。各种新方法、经完善后的传统经典方法以及商品试剂方...

生物信息学常见术语2016/5/11

BLAST：BasicLocalAlignmentSearchTool，基本的基于局部对准的搜索工具；一种快速查找与给定序列具有连续相同片断的序列的技术。Entrez：美国国家生物技术信息中心所提供的...

RNA分析的几个热点领域及主要技术路线2016/5/9

DNA，RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子，是生命现象的分子基础。基因组DNA中的基因通过转录为mRNA并进一步翻译为蛋白质，很多种类的蛋白质在zui终发挥功能时又经历磷酸化、糖基化、酶原激活等翻译...

单核苷酸多态性2016/5/3

SingleNucleotidePolymorphisms(SNPs)representanaturalgeneticvariabilityathighdensityinthehumangenome....

PCR假阴性问题总结2016/4/25

PCR的假阳性问题深受重视，但我个人认为PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，...