人髓母细胞瘤细胞；Daoy特性

细胞名称  人髓母细胞瘤细胞；Daoy特性
形态特性   多角
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞是1985年由Jacobsen PF建立的,源自一名4岁大的儿童的后颅窝肿瘤的活检组织，未检出神经元和胶质分化的特征；可用作转染宿主。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法   1:4~1:6传代；每周换液2~3次。
传代情况  C4
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：13，14；D16S539：10；D18S51：12；D19S433：14，14.2；D21S11：29，31.2；D2S1338：16，17；D3S1358：15；D5S818：11，13；D7S820：8，10；D8S1179：13，15；FGA：23；TH01：9；TPOX：8，10；vWA：14，20；
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量*，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
Anti-CD117/FITC  荧光素标记CD117抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-CD133 Anti-gen/FITC  荧光素标记造血干细胞抗原CD133抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-OX40/CD134/TNFRSF4/FITC  荧光素标记CD134抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-IL-7Ra/CD127/PE   荧光素PE标记兔抗人、大、小鼠、马、兔白细胞介素-7受体a抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-CD137/TNFRSF9/FITC  荧光素标记CD137抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-CD133 antigen/PE  荧光素藻红蛋白标记兔抗人、大、小鼠和果蝇CD133抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC  荧光素标记肿瘤坏死因子受体超家族成员14抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-Syndecan-1/CD138/FITC  荧光素标记多配体聚糖抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-CD141/FITC  荧光素标记凝血调节蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2ml
Anti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC  荧光素标记上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体IgG    Multi-class antibodies    规格：     0.2mlMtTF1    英文名称：    线粒体转录因子1抗体    ?0.2ml
MAD1    英文名称：    有丝分裂抑制缺陷蛋白1抗体    ?0.1ml
10-Mar    英文名称：    膜相关环指蛋白10抗体    ?0.1ml
MALT1    英文名称：    粘膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1抗体    ?0.1ml
MAdCAM-1    英文名称：    粘膜血管定居因子抗体    ?0.2ml
Maspin    英文名称：    抑癌基因抗体    ?0.1ml
MCK10    英文名称：    神经上皮*激酶/癌激酶10抗体    ?0.1ml
MICA    英文名称：    MHC I类链相关蛋白A/组织相容复合物MHCIa抗体    ?0.1ml
Midnolin    英文名称：    中脑核仁蛋白抗体    ?0.2ml
MIF    英文名称：    巨噬细胞移动抑制因子抗体    ?0.1ml
CCL3    英文名称：    巨噬细胞炎症因子1α抗体 MIP-1α    ?0.1ml
muscarinic Acetylcholine Receptor 1    英文名称：    毒蕈碱型乙酰*受体M1抗体    ?0.1ml