【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人膀胱移行细胞癌细胞;T-24使用说明书
形态特性 上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于病人的转移性细胞腺癌。有移行细胞癌的病人的白细胞和血清对T24和相关细胞株有细胞毒性。该细胞戏的倍增时间约为19小时。
培养条件 RPMI 1640(含2mM L-glutamine) (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 PN3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:16,18;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:20,23;D3S1358:16;D5S818:10,12;D7S820:10,11;D8S1179:14;FGA:17,22;TH01:6;THOX:8,11;vWA:15,17;
同工酶 无
染色体 62-69
使用权限 A类
产品名称 | 人膀胱移行细胞癌细胞;T-24使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CM-R015 大鼠胰岛细胞*培养基 100mL
CM-R016 大鼠胰腺星状细胞*培养基 100mL
CM-R017 大鼠胰腺导管上皮细胞*培养基 100mL
CM-R018 大鼠颌下腺上皮细胞*培养基 100mL
CM-R019 大鼠腮腺细胞*培养基 100mL
CM-R020 大鼠上皮细胞*培养基 100mL
CM-R033 大鼠肝实质细胞*培养基 100mL
CM-R034 大鼠肝动脉内皮细胞*培养基 100mL
CM-R035 大鼠肝动脉平滑肌细胞*培养基 100mL
CM-R036 大鼠小肠血管内皮细胞*培养基 100mL
CM-R037 大鼠小肠隐窝上皮细胞*培养基 100mL
CM-R038 大鼠肝内胆管上皮细胞*培养基 100mL
CM-R039 大鼠胃粘膜上皮细胞*培养基 100mLARD7 凋亡加强结构域蛋白7抗体
beta COP β衣被蛋白抗体
Caspase 4+Caspase 11 半胱胺酸蛋白酶4/11抗体
C1orf187 1号染色体开放阅读框187抗体
C9orf61 9号染色体开放阅读框61抗体
CTBP2 C末端结合蛋白2抗体
C21ORF13 21号染色体开放阅读框13抗体
Coronin 3 冠蛋白3抗体
CNTD 细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体
CH25H *25羟化酶抗体
CCHAC1 阳离子转运调控样蛋白1抗体
CIDE A DNA断裂因子相似蛋白A抗体