【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
| 产品名称 | 人肝癌细胞；HepG2使用说明书 |
| 货期 | 3－5天 |
| 发货地 | 上海 |
细胞名称 人肝癌细胞；HepG2使用说明书
形态特性 上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一15岁男性白人的肝细胞癌组织。模式染色体数为55条，有一条重排的1号染色体。此细胞对裸鼠没有致瘤性。未检测到HBV的基因组。
培养条件 10%FBS
传代方法 1:3传代；3-4天一次
传代情况 PN3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR Amelogenin：XY；CSF1PO:10,11；D13S317:9,13；D16S539:,13；D18S51:13,14；D19S433:15.2；D21S11:29,31；D2S1338:19,20；D3S1358:15,16；D5S818:11,12；D7S820:10；D8S1179:15,16；FGA:22,25；TH01:9；THOX:8,9；vWA:17；
同工酶 无
染色体 50-64
使用权限 A类
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CM-H093 人颅盖造骨细胞*培养基 100mL
CM-H094 人滑膜细胞*培养基 100mL
CM-H095 人骨骼肌细胞*培养基 100mL
CM-H096 人关节软骨细胞*培养基 100mL
CM-H112 人脂肪细胞*培养基 100mL
CM-H113 人表皮角质形成细胞*培养基 100mL
CM-H114 人前脂肪细胞*培养基 100mL
CM-H115 人脑动脉血管内皮细胞*培养基 100mL
CM-H116 人脑动脉血管平滑肌细胞*培养基 100mL
CM-H117 人脑静脉血管内皮细胞*培养基 100mL
CM-H118 人脑静脉血管平滑肌细胞*培养基 100mL
CM-H119 人脑膜细胞*培养基 100mL
CM-H120 人神经元细胞*培养基 100mL
CM-H121 人神经少突起前质胶质细胞*培养基 100mL
CM-H122 人神经星形胶质细胞*培养基 100mL
CM-H123 人神经小胶质细胞*培养基 100mLCNTF 睫状神经营养因子抗体
CK16 细胞角蛋白16抗体
C4orf17 4号染色体开放阅读框17抗体
CYFIP2 细胞质脆X智力低下蛋白结合蛋白2抗体
CRLF2 胸腺基质淋巴细胞生成素受体抗体
CK12 细胞角蛋白12抗体
Ceramide glucosyltransferase *半*γ合成酶抗体
CD5 CD5抗体
ICAM1 细胞间粘附分子-1抗体
CD56 神经细胞粘附分子1抗体
CD62L L选择素抗体
CD68 CD68抗体
