人肾透明细胞腺癌；786-0复苏

细胞名称  人肾透明细胞腺癌；786-0复苏
形态特性   上皮样细胞
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一个原发性透明细胞癌。 此细胞有微绒毛和桥粒，能在软琼脂是生长。 此细胞生成的一个PTH样的多肽与乳癌和肺癌中的肽相似。 这个多肽的N端与PTH相似，活性与PTH相似，分子量为6000道尔顿 
培养条件   RPMI 1640（含2mM L-glutamine） (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法   1:3传代；3-4天一次
传代情况  PN2
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法（-）
STR   Amelogenin：XY；CSF1PO:10；D13S317: 8；D16S539: 12；D18S51: 13,14；D19S433: 14,15；D21S11: 29, 30；D2S1338: 17, 18；D3S1358: 16；D5S818:9；D7S820: 11,12；D8S1179:12,13；FGA: 24；TH01: 6, 9.3；THOX: 8,11；vWA:15,17；
同工酶  无
染色体   82-88
使用权限  A类

来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量*，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
aspase-1 p20    天冬氨酸-*特异蛋白酶家族抗体
Calneuron 1    钙营养蛋白1/钙结合蛋白8抗体
CABP5    钙结合蛋白5/3抗体
SLC7A5    CD98轻链抗体
CLPS    胰辅脂酶抗体
C17orf104    17号染色体开放阅读框104抗体
CART    卡因和调节转录蛋白抗体
CCN1    富半*肝素结合蛋白61抗体
C2orf65    2号染色体开放阅读框65抗体
CTNNBL1    β连环蛋白样蛋白1抗体CM-R021    大鼠胰腺上皮细胞*培养基    100mL
CM-R022    大鼠甲状腺上皮细胞*培养基    100mL
CM-R023    大鼠淋巴管内皮细胞*培养基    100mL
CM-R024    大鼠淋巴成纤维细胞*培养基    100mL
CM-R025    大鼠外周血白细胞*培养基    100mL
CM-R026    大鼠骨髓基质细胞*培养基    100mL
CM-R027    大鼠食管上皮细胞*培养基    100mL
CM-R028    大鼠食管平滑肌细胞*培养基    100mL
CM-R029    大鼠肠平滑肌细胞*培养基    100mL
CM-R030    大鼠肠粘膜上皮细胞*培养基    100mL
CM-R031    大鼠肠动脉内皮细胞*培养基    100mL
CM-R032    大鼠肠静脉内皮细胞*培养基    100mL