人支气管平滑肌细胞

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人支气管平滑肌分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由支气管分出的各级分枝，由支气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是，支气管是以“C”型的支气管软骨为支架，而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能：①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力，保持支气管形态；②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础；③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质，发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的人支气管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人支气管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠膜联蛋白A5(ANXA5)试剂盒 ，英文名： ANXA5 ELISA Kit

Mouse ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 小鼠原激活肽(TAP)试剂盒

Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 大鼠黑色素细胞抗体(MCAb)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGGT(Humangammaglamylanspeptidase)ELISAKit人γ谷氨酰转移酶

细胞甘油-3-0酸脱氢酶-2(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase-2)活性比色法定量试剂盒20次

RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)试剂盒规格：96T/48T

小鼠热休克蛋白试剂盒   小鼠热休克蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠热休克蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠热休克蛋白试剂盒、小鼠热休克蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠热休克蛋白9试剂盒   小鼠热休克蛋白9试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠热休克蛋白9试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠热休克蛋白9试剂盒、小鼠热休克蛋白9试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠缺血修饰白蛋白试剂盒   小鼠缺血修饰白蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠缺血修饰白蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠缺血修饰白蛋白试剂盒、小鼠缺血修饰白蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠全段甲状旁腺素试剂盒   小鼠全段甲状旁腺素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠全段甲状旁腺素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠全段甲状旁腺素试剂盒、小鼠全段甲状旁腺素试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

KIAA1161蛋白抗体

小鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit G(IgG)试剂盒

HumanCeruloplasmin,CP/CERELISAKit 人铜蓝蛋白(CP/CER)试剂盒 96T/48T 进口分装

Equinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/ELA试剂盒马主要组织相容性复合体(MHC/ELA)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性PNPG5酶偶联比色法定量检测试剂20次

Mousecoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)试剂盒规格：96T/48T

甲基化样蛋白7B抗体

IL12A & IL12B重组小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

Kruppel样因子4(KLF4)重组蛋白 Recombinant Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

RNASE1重组人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重组人 CNTF 蛋白

GPT2 Protein Rat 重组大鼠 GPT2 蛋白

人支气管平滑肌细胞阿黑皮素原(POMC)重组蛋白 Recombinant Proopiomelanocortin (POMC)

CNTF Protein Human 重组人 CNTF 蛋白

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (Fc 标签) Protein

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

AIF1重组人 IBA1 / AIF1 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。