细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介:
人外周血B淋巴分离自外周血;B淋巴细胞的祖细胞存在于胎肝的造血细胞岛中,此后B淋巴细胞的产生和分化场所逐渐被骨髓所代替。B淋巴细胞简称B细胞,成熟的B细胞主要定居于淋巴结皮质浅层的淋巴小结和脾脏的红髓和白髓的淋巴小结内。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞,浆细胞可合成和分泌抗体(免疫球蛋白),主要执行机体的体液免疫。与T淋巴细胞相比,它的体积略大。这种淋巴细胞受抗原刺激后,会增殖分化出大量浆细胞。浆细胞可合成和分泌抗体并在血液中循环。从骨髓来的干细胞或前B细胞,在迁入法氏囊或类囊器官后,逐步分化为有免疫潜能的B细胞。成熟的B细胞经外周血迁出,进入脾脏、淋巴结,主要分布于脾小结、脾索及淋巴小结、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小结中,受抗原刺激后,分化增殖为浆细胞,合成抗体,发挥体液免疫的功能。
方法简介:
实验室分离的人外周血B淋巴采用取外周血、通过密度梯度离心法结合磁珠分选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人外周血B淋巴经CD19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 外周血 | 产品货号 | YS-01X8304 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 圆形 |
培养信息:
培养基:基础培养基,含IL-2、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:圆形
传代特性:不建议传代
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人外周血B淋巴体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
公司正在出售的产品:
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 试剂盒
Human vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 人2(VD2)试剂盒
HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 人相关血浆蛋白A(PAPP-A)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAF试剂盒人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)试剂盒规格:96T/48T
桌面DNA清除溶液500毫升
Humansecretorycompone,SCELISAKit人分泌成分(SC)试剂盒规格:96T/48T
人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒 人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒 规格型号:96T/48T 人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒、人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人组织蛋白酶抗体试剂盒 人组织蛋白酶抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 人组织蛋白酶抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人组织蛋白酶抗体试剂盒、人组织蛋白酶抗体试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人组织蛋白酶K试剂盒 人组织蛋白酶K试剂盒 规格型号:96T/48T 人组织蛋白酶K试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人组织蛋白酶K试剂盒、人组织蛋白酶K 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人组织蛋白酶D试剂盒 人组织蛋白酶D试剂盒 规格型号:96T/48T 人组织蛋白酶D试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人组织蛋白酶D试剂盒、人组织蛋白酶D 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
eIF3s8蛋白抗体
豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒
HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落叶型天疱疮抗体(PF)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancyclicadenosinemonophosphate,cAMP试剂盒人环0酸腺苷(cAMP)试剂盒规格:96T/48T
组织FES激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanProcalcitonin,PCTELISAKit人降钙素原(PCT)试剂盒规格:96T/48T
胱抑素C单克隆抗体
SPOCK1重组人 SPOCK1 / Testican 1 蛋白 (aa 21-429, His 标签) Protein
SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine 0.5mgSPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱的酸性分泌蛋白抗原
CD36重组人 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
IL2 Protein Human 重组人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A)
RBP4 Protein Human 重组人 RBP4 蛋白
人外周血B淋巴细胞SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine 0.5mgSPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱的酸性分泌蛋白抗原
IL2 Protein Human 重组人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A)
SPOCK1重组人 SPOCK1 / Testican 1 蛋白 (aa 21-429, His 标签) Protein
RBP4 Protein Human 重组人 RBP4 蛋白
CD36重组人 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。