Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I
搜索关键词：
Extracellular Matrix (ECM) 细胞外基质；Gelatin 明胶；Collagen Type I 胶原蛋白I型；Poly-L-lysine 多聚L-赖氨酸；Fibronectin 纤连蛋白；Matrigel基质胶； CAS：9007-34-5 ；
产品信息：
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I | MX0910-2ML | 2ml (10mg) | 450 |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I | MX0910-10ML | 10ml (50mg) | 2000 |
基本介绍：
胶原蛋白是结缔组织和内脏器官细胞外基质的主要构造成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布为广泛。从遗传和结构上胶原蛋白分为许多类型。胶原蛋白I（Collagen, Type I）是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃，中性pH下自发形成三螺旋骨架，是一种优秀的细胞培养用基质，广泛用于肝细胞、成纤维细胞、脊神经节、肌肉细胞、施万细胞、胚肺细胞、上皮细胞和其他大量细胞系。还能用于研究细胞生长、分化、迁移以及发育过程中的组织形态发生。
懋康生物提供的鼠尾胶原蛋白I是根据Birkedal-Hansen方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备。可用于包被细胞培养器皿，培养细胞表面粘附性，特别适合那些在普通培养器皿表面不易贴壁的细胞，比如成纤维细胞、肝细胞等原代细胞。还可用于三维胶的制备，模拟真实的生长环境，使得细胞在三维环境中生长。
本品为溶于6mM HAc的无菌溶液，浓度5mg/ml，每个批次产品皆通过细胞培养测试（包括三维空间培养）以保证质量的可靠性。
注意事项
整个操作请于冰上进行，因室温鼠尾胶原I可迅速成胶，操作过程尽量保持低温。
整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 细胞培养器皿的表面包被
组织培养器皿的表面包被推荐浓度为1-5µg/cm2，起始浓度可首玄5µg/cm2。建议根据具体细胞类型来优化。
1.1 6mM HAc稀释液的制备
本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的无菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建议用6mM HAc溶液做进一步稀释。
配制方法：取34.5µl 冰醋酸（17.4 M）加入100ml双蒸水，充分混匀后即得到6mM HAc溶液，0.22µm滤膜过滤除菌后待用。
1.2 包被步骤
a，根据自身实验体系以及优化后的包被浓度来计算所需的胶原蛋白量，并加入相应孔内，确保胶原蛋白溶液*覆盖表面。
以包被浓度为5µg/cm2，先用6mM HAc稀释液将胶原蛋白（5mg/ml）稀释到合适的中间浓度，如50µg/ml，
然后参考表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表 来加量到各孔内；
以包被浓度为2µg/cm2，先用6mM HAc稀释液将胶原蛋白（5mg/ml）稀释到合适的中间浓度，如12µg/ml，然后参考表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表来加量到各孔内；
表1 不同培养皿内胶原蛋白加量表
培养皿类型 | 每孔/皿表面积（cm2） | 当包被浓度：2µg/cm2，中间稀释浓度：12µg/ml，加入该稀释液的体积（µl） | 当包被浓度：5µg/cm2，中间稀释浓度：50µg/ml，加入该稀释液的体积（µl） |
96 well | 0.3 | 50 | 30 |
24 well | 1.9 | 300 | 190 |
12 well | 3.8 | 600 | 380 |
6 well | 9.5 | 1580 | 950 |
35mm | 8 | 1330 | 800 |
60mm | 21 | 3500 | 2100 |
100mm | 55 | 9170 | 5500 |
b，室温孵育1h，小心吸掉多余液体，用无菌PBS清洗3~4次后直接使用。或者加完胶原蛋白溶液后，在超净台内开盖过夜晾干。无菌条件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3个月。
2. 三维胶原的制备
当鼠尾胶原蛋白I使用浓度>1mg/ml，pH 7.0左右皆可形成具有一定强度的三维胶，建议成胶浓度为1-2 mg/ml。
由于本品是以溶于6mM HAc的无菌溶液形式提供，在成胶过程需先加入0.06倍体积的0.1M NaOH中和。
2.1 需要溶液准备（无菌、预冷）
2.2 三维胶原制备（不含细胞）（以配制1ml，1mg/ml三维胶为例）：
2.3 三维胶原制备（含细胞）（以配制1ml，1mg/ml三维胶为例）：
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— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾胶原蛋白I 细胞培养
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