2019年06月10日 19:55上海懋康生物科技有限公司点击量：1062
Sh Ble基因筛选抗生素：博莱霉素（Zeocin）和腐草霉素（Phleomycin）
（maokangbio整理，交流学习用)
博莱霉素（Bleomycins，BLMs）是由轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）代谢产生的一种抗肿瘤糖肽抗生素大家族，该家族的成员目前使用比较多的是博莱霉素（Bleomycin）家族和腐草霉素（Phleomycin）家族，前者主要用做抗肿瘤化合物，与其他的抗癌剂联合使用，用于治疗淋巴瘤、鳞状细胞癌和睾完癌等。后者主要用作分子遗传学研究中的一种选择性抗生素，用来筛选携带抗性基因Sh ble等的稳定转染细胞。
我司（懋康生物）在销售博莱霉素BLMs家族抗生素的过程中常遇到用户询问几种热卖产品的区别，现做出以下解释，供交流学习用。
对于腐草霉素（Phleomycin）（MS0008-1ML）, 是一种糖肽类抗生素，结构上类似于抗生素Bleomycin (BLM)。纯化的腐草霉素主要由腐草霉素D1（Phleomycin D1）（末端胺基是胍丁胺）以铜离子螯合和盐酸盐形式提供。腐草霉素阻断细胞周期进入S期，虽然腐草霉素类似于Bleomycin，能破坏DNA，但不用作一种抗肿瘤剂。目前腐草霉素的作用机理并未*得以阐明，据报道由于修饰的二噻唑部分，其不能插入DNA。RAD6 DNA修复基因在突变酵母内对腐草霉素抗性是必须的。
分子遗传实验中腐草霉素用作一种选择性抗生素，其具广谱的毒性，对细菌、真核微生物和植物和动物细胞呈体内活性。腐草霉素因此能用于鉴定和筛选含腐草霉素抗性基因比如Sh ble基因的各种细胞。
对于Zeocin™（MS0009-125MG）是博莱霉素/腐草霉素（bleomycin/phleomycin）抗生素家族的成员之一，从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到，对细菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。Zeocin™是腐草霉素D1的商业名称，一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色，此铜螯合的形式为无活性。一旦进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin™被活化，嵌入DNA使其断裂，终导致细胞死亡。
腐草霉素（Phleomycin）与Zeocin™有效成分基本差不多，这也是这两种化合物的CAS号是一致的。但也有些许差异，腐草霉素（Phleomycin）建议用于对Zeocin™敏感性比较差的细胞，比如：丝状真菌和某些酵母菌。
腐草霉素（Phleomycin）与Zeocin™的基本特性（见下表格）：更多信息请见maokangbio整理内容。
基本特性 | 腐草霉素（Phleomycin） | 博莱霉素（Zeocin™） |
编号 | MS0008-1ML（20MG）/5ML | MS0009-125MG/1G |
报价 | 598/2768 | 420/2850 |
CAS NO. | 11006-33-0 | 11006-33-0 |
外观 | 蓝色溶液（20mg/ml） | 蓝色溶液（100mg/ml） |
筛选浓度 | 大肠杆菌筛选：25-50μg/mL（低盐LB培养基，NaCl浓度不能超过5g/L） 酵母菌筛选：50-300μg/mL（YPD或基本培养基） 哺乳动物细胞筛选：50-1000μg/mL（合适培养基，根据细胞系而不同） | 大肠杆菌：含5µg/ml腐草霉素的低盐LB固体培养基； 酵母菌：含10µg/ml腐草霉素的YEPD培养基； 真菌：含10-50µg/ml腐草霉素的再生培养基，取决于宿主菌敏感性。 植物细胞：5-25µg/ml腐草霉素，取决于植物类型； 动物细胞：5-50 µg/ml腐草霉素，初次实验使用杀灭曲线来筛选加工作浓度； |
Sh ble基因赋予抗性的原理：来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因编码一种13,665Da大小的蛋白，该产物以化学计量方式结合Zeocin或phleomycin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的宿主细胞被赋予Zeocin或phleomycin抗性。
—Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】
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