TRITC标记鬼笔环肽注意事项和操作流程

2021年12月21日 16:49上海懋康生物科技有限公司点击量：478

Phalloidin 鬼笔环肽；F-actin 肌动蛋白（聚合）；G-actin 球形肌动蛋白（单体）；Actin Polymerization 肌动蛋白聚合；Cytochalasin细胞松弛素；CAS NO.：17466-45-4；

产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
TRITC Phalloidin TRITC标记鬼笔环肽	MX4405-300T	300T	568
TRITC Phalloidin (Powder) TRITC标记鬼笔环肽	MX4406-1MG	1mg	4128

【温馨提示】：见我司整理的鬼笔环肽及衍生物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）产品专题。

产品描述

鬼笔环肽（Phalloidin），又称鬼笔鹅膏素，zui初是从毒蘑菇鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）中分离到的一种七肽毒素，以*的亲和力和特异性结合肌动蛋白丝F-actin（聚合形式的肌动蛋白），不会结合单体肌动蛋白（G-actin）。不像肌动蛋白抗体，同时识别单体和聚合形式的肌动蛋白。鬼笔环肽对大小纤维的亲和力相近，在许多不同的动植物物种的肌肉和非肌肉细胞中，基本都按照一个肌动蛋白亚基与一个鬼笔环肽分子的化学计量比结合。不像肌动蛋白抗体，对不同物种或来源的肌动蛋白亲和力会发生明显变化。鬼笔环肽的非特异性结合几乎可忽略，染色和未染色区域的差异极其明显。鬼笔环肽使得肌动蛋白聚合/解离的临界浓度降至1μg/ml，可用作一种聚合增强剂。另外，产生的复合物高度稳定（解离常数约3×10^–8M），能够抑制细胞松弛素、KI和温度上升引起的去聚合和去组装活性。

鬼笔环肽及其衍生物在纳摩尔浓度即可对F-actin染色，且水溶性良好，是非常实用和方便的探针，对组织切片、细胞培养物或无细胞体系内的F-actin进行定性和定量研究。另外，鬼笔环肽及其衍生物很小，直径约12–15 Å，分子量<2000 Da，经标记后的F-actin仍维持许多标记前的功能。比如，标记的甘油抽提肌纤维仍能收缩；标记的肌动蛋白丝仍能在固相肌球蛋白基质中移动。

本品为TRITC荧光标记的鬼笔环肽（TRITC-Phalloidin），以溶于甲醇的20µM储存液形式提供，具体的工作浓度请参考文献或自身实验体系来调整，常用浓度范围80-200nM。按照100nM的工作浓度来算，可进行300次细胞染色。

产品应用

1）对固定的组织切片和组织细胞培养物进行肌动蛋白丝（F-actin）的荧光染色；

2）体外制备稳定的荧光肌动蛋白丝（F-actin）；

注意事项

1）本品（Cat# MX4405）以溶于甲醇的储存液（20µM）形式提供，300T包装，适合用量少的研究者；另提供冻干粉形式（Cat# MX4406），1mg包装，相对更经济，适合用量多的研究者；

2）本品具有一定的毒性，LD₅₀=2mg/kg，操作时请注意防护。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作流程（免疫荧光染色）【详见懋康整理】

有几种方法都能用来染色组织细胞培养物内的肌动蛋白丝（F-actin）染色，其中，固定步骤在获得可信且具代表性的细胞F-actin分布情况中至关重要。固定步骤基于实验自身需求来选择。多聚甲醛或戊二醛都能得到优秀的F-actin染色和良好的板状伪足维持保存。

一、实验材料准备

二、染色工作液准备

三、染色流程

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