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20 2017-6

mRNA差异PCR技术

生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因,而主基因在某个特定的细胞中,只有占15%的一小部分表达。而且在不同的细胞中,选择性表达的基础也是...

15 2017-6

扩增较大片段DNA的PCR方法

通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcusfuriosus)dna聚合酶,具有完整的3’外切酶校读活性(3’-editing-exonucle...

12 2017-6

PCR片段拼接的SOE和SDL方法

PCR技术(多聚酶链式反应)是现代分子生物学的一个巨大突破,它能在体外迅速、大量、灵敏地扩增基因片段。可是,经PCR技术扩增的大量相关基因片段如何能有效拼接,却是一个很值行探讨的问题。传统的方法是引入...

7 2017-6

反义技术——RNA干扰

zui近由于RNA干扰(RNAinterference,RNAi)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象zui早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于zu...

2 2017-6

序列测定的技术和策略

测序策略目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射...

31 2017-5

构建无需限制性内切酶和连接酶的cDNA文库

克服文库构建的缺陷传统的cdna文库构建途径有许多与生俱来的缺陷:1)cDNA合成不佳,2)连接效率低,3)在限制性酶切过程中造成克隆缺口或者断裂。任何一种缺陷都有可能造成目的克隆的丢失,尤其对于低丰...

24 2017-5

神经肽VIP和PACAP防止活化T细胞凋亡通路图

Vasoactiveintestinalpeptide(VIP)andthestructurallyrelatedpituitaryadenylatecyclase-activatingpolypep...

22 2017-5

Caspase信号级联通路图

Caspase是一类对天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶,是与秀丽隐杆线虫Ced一3具有序列和结构同源性的一个蛋白家族,在细胞凋亡执行过程中直接参与早期凋亡启动、信号传递及晚期凋亡效应,除此之外,部分cas...

16 2017-5

无血清技术及其培养基

一、无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘...

24 2017-4

孚尔根反应的方法和原理

实验目的1.熟悉并掌握Feulgen反应的原理及其实验操作方法2.对细胞的免疫组化研究方法有一初步的认识实验原理自Feulgen等发明该显示DNA的Feulgen反应法以来,其作用机制也久经研究和讨论...

10 2017-4

16sDNA简介及其应用于细菌鉴定的优点

近年来,基于pcr扩增的基因诊断技术备受青睐,细菌核糖体16S小亚基基因(16SrDNA)鉴定引起了科研人员的广泛关注。16SrDNA是细菌的系统分类研究中zui有用的和zui常用的分子钟,其种类少,...

5 2017-4

Lentivirus的包装和感染

1转染前一天将293T细胞铺于10cm板,当细胞密度达到80%左右即可进行PEI转染。2将下列DNA加入一个已装有480ul1*HBS(PH7.4)灭菌管混匀三质粒系统:12ugvector6ugVS...

27 2017-3

遗传学实验之——染色体组型分析

实验原理定义:染色体组型又称核型,是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的体细胞内的整套染色体,按它们相对恒定的特征排列起来的图像。核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐...

20 2017-3

光学显微镜的使用与细胞化学成分的分析

一、显微镜的结构及使用方法•1、光学显微镜的主要构造机械部分照明部分光学部分•2、光学显微镜的使用方法对光→置片→低倍→高倍→复原低倍镜使用高倍镜使用•3、使用光学显微镜的注意事项二、酸性蛋白和碱性蛋...

8 2017-3

细胞培养污染对策及预防方法

§污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型§细胞培养过程...

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