启动子克隆方法研究进展2017/8/14

随着基因工程的发展，常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大，是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法，对研究基因表达调控和构建表达载体至关重...

PCR反应的五要素2017/8/7

1、引物引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大...

免疫PCR [Immuno PCR, Im2017/8/2

一、定义；免疫PCR是利用抗原抗体反应的特异性和pcr扩增反应的*灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。用抗体检测抗原是免疫学的zui基本方法，用酶或同位素标记抗体可使检测的敏感性提高，常用的定量检测方...

RNA质量的经验谈！2017/7/18

1）检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82....

基因克隆：感受态细胞制作2017/7/10

方法一A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用无菌水配，配后不需灭菌；C液称取CaCl20.10g，KCl1.18g，全部转入细口试剂瓶，然后加入46ml三蒸水，轻轻振...

推荐：RNA的制备2017/7/4

一、mRNA的分离与rRNA和tRNA不同的是，哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3’端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNA。在构建c...

用RNAi技术研究基因功能2017/6/29

February6,2004—AmethodfordeterminingthefunctionoflargenumbersofgenesisbeingdevelopedａndpilotedbyHowa...

RNAi的应用2017/6/26

1.研究基因功能的新工具已有研究表明RNAi能够在哺乳动物中灭活或降低特异性基因的表达，制作多种表型，而且抑制基因表达的时间可以随意控制在发育的任何阶段，产生类似基因敲除的效应。线虫和果蝇的全部基因组...

RNAi技术的研究进展与发展前景2017/6/22

(RNAinterference，RNAi)是1998年由Fire等在线虫中发现的一种转录后的基因沉默(Posttranscriptionalgenesilencing，PTGS)机制。双链RNA(d...

士锋EST技术介绍2017/6/15

摘要：随着人类基因组计划的顺利进行，EST技术被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的数据，从ESTs即cDNA的部分序列入手，通过同源筛选，获得基因...

士锋PCR技术（五）：常见问题分析与对策2017/6/12

PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带pcr反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR...

RNAi在动物实验中表现良好2017/6/2

研究人员利用包装入病毒载体中的小分子RNA对有遗传疾病的小鼠进行治疗。这一成果提高了RNA干扰技术能够运用在人类临床试验上的可能性。亨丁顿舞蹈症（Huntington’sdisease）和脊髓性小脑萎...

PCR技术*讲座2017/5/31

聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要...

烟酰胺乙酰胆碱受体在凋亡中的作用通路图2017/5/24

烟酰胺乙酰胆碱受体在凋亡中的作用Nicotinicacetylcholinereceptorsareessentialforneuromuscularsignalingａndarealsoexpres...

Fas/Fas L信号通路图2017/5/22

fas/FasL信号通路zui早被证明在细胞凋亡中起着重要的作用。Fas是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，它与FasL结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。它的活化包括一系列步骤：首先...