Snailase 蜗牛酶 分子生物学

Snailase 蜗牛酶

温馨提示

见我司（懋康生物）整理的Zymolyase®酵母细胞壁溶解酶（酵母裂解酶）产品专题。

产品标签

Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶；Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶；Lyticase；Lywallzyme真菌溶壁酶；Protoplast原生质体；Spheroplast原生质球；

产品信息

【温馨提示】：蜗牛酶作为一种混合酶（粗制酶），应用范围非常广泛（包括植物、真菌和酵母细胞壁的消化），针对不同样本类型，适宜的酶工作浓度、酶工作缓冲液，消化时间等都会有显著差异，以及是否需组合其他的工具酶（比如：纤维素酶R-10，崩溃酶，溶壁酶）使用，请初次使用本品的用户，务必参考文献或设置不同条件来摸索适宜的酶工作条件【见：蜗牛酶的应用示例】。

产品描述

蜗牛酶（Snailase），是从蜗牛嗦囊和消化道提炼和制备的一种混合酶，含纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀fen酶、脱羧酶、蛋白酶等20多种酶，能够用于酵母细胞壁的溶解，广泛用于细胞生物学和基因工程学研究。还能用作饲料添加剂，提高饲料的消化率；也可用作果汁澄清、果酱制作。

酶活性鉴定方法

将蜗牛酶溶解于SED缓冲液，配制10mg/ml的浓度。取1ml处理好的酵母悬液，加入250µl（10mg/ml）的蜗牛酶，混匀后于30℃酶解2h。

SE缓冲液：1M山li醇，25mM EDTA, pH 8.0；

SED缓冲液：19ml SE缓冲液加入1ml DTT；

酶活性鉴定结果

破壁率：pH5.8～7.2等渗的山li醇溶液中，每g细胞经30～40mg酶在37℃酶解1h，即可溶解细胞壁，破壁率80～90%以上。

破壁活性：每μg的酶，30℃，2h内可有效降解1.28×106个酵母细胞。

不同酶量对相同酵母细胞的破壁作用：以6.2×108个酵母细胞为研究对象，随酶量的增加，更多的酵母被消化。1h内，80μg时酶的作用效率越高，800μg时被消化的酵母越多。

酶活性持续性：连续时间抽样后经浊度和蛋白浸出量分析表明，30℃，1h，酶活性具有持续活性。

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，2年有效

运输：室温运输。

应用示例【来自文献，仅做交流学习用】

Ref1）Cai R, Xiao Y, Xing J, Yu K, Li X and Chai Y (2024) Establishment of a genetic transformation system for cordycipitoid fungus Cordyceps chanhua. Front. Microbiol. 15:1333793. doi: 10.3389/fmicb.2024.1333793

j 酶解对象：虫草真菌Cordyceps chanhua strain

k 酶解方法：通过预实验来优化影响原生质体制备的单一条件，分别设置不同的渗透压稳定液（0.7M NaCl、0.7M KCl、0.7M MgSO4、0.7M甘lu醇和0.7M蔗糖），蜗牛酶浓度（2，4，6，8，10和12mg/ml）和酶消化时间（2.5，3，3.5，4，4.5和5h）。5g菌丝加入10ml酶消化液，37℃，150rpm消化一段时间。

l 最佳酶解条件：在0.7M山li醇、6mg/ml蜗牛酶的体系中，消化4h，能得到最高的原生质体产率（5.53×108 protoplasts/mL）。

Fig.Effect of osmotic stabilizers, enzymatic hydrolysis concentration and enzymatic hydrolysis time on protoplasts preparation of strain 022017-3. (A) Osmotic stabilizers. (B) Snailase concentration. (C) Enzymatic hydrolysis time (**p < 0.01 and *p < 0.05).

Ref2）Chen W, Liu G, Zhang Y. Production of Rhamnosyl Icariside II by snailase hydrolysis of Epimedium wushanense extracts. Heliyon. 2023 Dec 17;10(1):e23805. doi: 10.1016/j.heliyon.2023.e23805. PMID: 38192750; PMCID: PMC10772167.

j 酶解对象：巫山淫羊藿(E.wushanense)

k 酶解方法：200μL提取物（Epimedin C = 20.3 mg/mL）和4mg酶溶于1.8ml缓冲液（0.20 M HOAc-NaOAc buffer (pH 5.0)），50℃反应。之后，分别在1，2，4，8，12，24，36，48和72h时，取100μL反应液用900μL甲醇稀释，用0.45μm滤器过滤后，用于HPLC-UV分析。

l 最佳酶解条件：在筛选的6种商业化酶（aringinase, cellulase, snailase, pectinase, diastase, and β-glucosidase），蜗牛酶表现最佳，优化蜗牛酶的工作条件。总结，淫羊藿总黄酮（4mg/ml），蜗牛酶/淫羊藿总黄酮（1:1, w/w），在醋酸钠（pH 5.5）于55℃，消化4h，得到的淫羊藿次苷II（Rhamnosyl Icariside II）最高。

Fig.Optimization of enzymatic hydrolysis conditions. (A) Enzyme/Epimedium flavonoids ratio, (B) buffer, (C) pH of the buffer, (D) reaction temperature, (E) concentration of Epimedium flavonoids, (F) reaction time.

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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