小鼠视网膜Muller细胞实验方法

1.产品名称：小鼠视网膜Muller细胞实验方法

2.组织来源：视网膜组织

3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠视网膜Muller细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。*神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处zui多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力zui强。视网膜Muller细胞作为视网膜中的主要胶质细胞，大约占视网膜胶质细胞的90%，因而在视网膜疾病中起着何种作用也受到越来越多的关注。在超微结构水平上，Muller细胞的胞质似乎比临近的其他细胞更高的电子密度，更发达的内质网，细胞核是典型的卵圆形或多角形。但在不同物种中或同一物种中的不同部位，Muller细胞形态也会有所差异的。视网膜Muller细胞是一种特化的神经胶质细胞，不仅具有维持视网膜的正常结构和功能的作用，并调制视网膜神经元活动，还能参与多种病理过程，尤其是眼底增殖性病变，如增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变等，体外培养Muller细胞是研究这些增殖性病变途径之一。

本公司的小鼠视网膜Muller细胞采用胶原酶消化法和*反复消化法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经GFAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息：

DMEM[H]、FBS、胶质细胞生长添加剂、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-* 
大鼠晚期糖基化终末产物 
人白介素12 
人白介素11 
小鼠抗血小板抗体IgG/M/A 
大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 
大鼠幽门螺旋菌IgG 
人白介素10 
小鼠纤连蛋白 
小鼠FMS样*激酶3 
大鼠雌激素受体 
人胰岛素样生长因子结合蛋白4 
人胰岛素样生长因子结合蛋白3 
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1 
大鼠β-防御素 
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2 
大鼠多巴胺D1受体 
人胰岛素样生长因子结合蛋白2 
人胰岛素样生长因子结合蛋白1 
大鼠肾上腺素能a1A受体 
小鼠白介素16 
小鼠白介素3 
人胰岛素样生长因子2 
大鼠钙结合蛋白 
小鼠白介素4 
大鼠透明质酸结合蛋白 
人胰岛素样生长因子1 
人γ干扰素 
大鼠骨形成蛋白6 
小鼠白介素5 
小鼠层连蛋白/板层素 
人细胞间粘附分子1 
大鼠淋巴细胞因子 
人肝细胞生长因子 
小鼠巨噬细胞集落刺激因子 
大鼠微量蛋白 
小鼠巨噬细胞来源的趋化因子 
人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 
大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-* 
小鼠正常T细胞表达和分泌因子 
c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  兔心肌特异性肌钙蛋白T   96T
LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit  兔*   96T
PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit  兔子催乳素   96T
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit  兔子促黄体激素   96T
ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit  兔抗脑组织抗体   96T
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit  兔p53   96T
BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit  兔Bcl-2相关X蛋白   96T
ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit  兔*   96T
MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit  兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A   96T
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit  兔抑瘤素M   96T
ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit  兔血管生成素2   96T
ANG- II (Rabbit angiotension II ) ELISA Kit  兔血管紧张素Ⅱ   96T
sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  兔可溶性凋亡相关因子   96T
6-keto-PGF1a (Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit  兔6酮前列腺素F1a   96T
TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit  兔血栓素B2   96T
VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  兔血管内皮细胞粘附分子1   96T
Fbg (Rabbit Fibrinogen) ELISA Kit  兔血纤蛋白原   96T
D2D (Rabbit D-Dimer) ELISA Kit  兔子D二聚体   96T