小鼠肺大动脉平滑肌细胞实验方法

1.产品名称：小鼠肺大动脉平滑肌细胞实验方法

2.组织来源：肺动脉组织

3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠肺大动脉平滑肌细胞分离自肺大动脉组织；肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺大动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一，在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺大动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺大动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发生发展的重要病理学特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键。研究表明，急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压，即缺氧性肺动脉高压，推断缺氧可能是通过促进肺大动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发生发展。肺大动脉平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺大动脉平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。

本公司的小鼠肺大动脉平滑肌细胞采用*-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
(HDL) 96T Y17128 Homo sapiens (Human)
α2-巨球蛋白(α2M)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M) 96T Y17129 Homo sapiens (Human)
β-乳球蛋白(βLg)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg) 96T Y17130 Bos taurus; Bovine (Cattle)
白蛋白(ALB)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Y17131 Homo sapiens (Human)
白蛋白(ALB)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Y17132 Mus musculus (Mouse)
白蛋白(ALB)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Y17133 Rattus norvegicus (Rat)
甘丙肽(GAL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Y17134 Homo sapiens (Human)
甘丙肽(GAL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Y17135 Mus musculus (Mouse)
甘丙肽(GAL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Y17136 Rattus norvegicus (Rat)
低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 96T Y17137 Homo sapiens (Human)
抗利尿激素(ADH)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 96T Y17138 Homo sapiens (Human)
抗利尿激素(ADH)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 96T Y17139 Mus musculus (Mouse)
*(LZM)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Lysozyme (LZM) 96T Y17140 Chicken (Gallus)
透明质酸酶(HAase)检测试剂盒(化学发光免疫分析法
Anti-IL-28B/IL-28C/FITC  荧光素标记白细胞介素28B抗体IgG   0.2ml
Anti-IL-29/IFNL1/FITC  荧光素标记白细胞介素29抗体IgG   0.2ml
Anti-IL-31/FITC  荧光素标记白细胞介素31抗体IgG   0.2ml
Anti-IL-31RA/CRL3/FITC  荧光素标记白介素31受体a抗体IgG   0.2ml
Anti-IL-32/NK4/FITC  荧光素标记白介素32抗体IgG   0.2ml
Anti-IL-33/NFHEV/FITC  荧光素标记白介素33抗体IgG   0.2ml
Anti-IL-33/FITC  荧光素标记白介素33抗体IgG   0.2ml
Anti-ILK-1/FITC  荧光素标记整合素连接激酶-1抗体IgG   0.2ml
Anti-ILT2/CD85j/FITC  荧光素标记细胞表面免疫球蛋白样转录因子2抗体IgG   0.2ml
Anti-ILTV/FITC  荧光素标记抗鸡传染性喉气管炎病毒抗体IgG   0.2ml
Anti-IMP3/FITC  荧光素标记胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3抗体IgG   0.2ml
Anti-ING1/p33/FITC  荧光素标记生长抑制因子基因1抗体IgG   0.2ml
Anti-Inhibin Alpha/FITC  荧光素标记抑制素α抗体IgG   0.2ml
Anti-Inhibin BetaA/FITC  荧光素标记抑制素βA抗体IgG   0.2ml
Anti-Inhibin Beta B /FITC  荧光素标记抑制素βB抗体IgG   0.2ml
Anti-Inhibin Beta C /FITC  荧光素标记抑制素βC抗体IgG   0.2ml
Anti-Inhibin Alpha/Biotin  *化抑制素α抗体IgG   0.2ml
Anti-Insulin/FITC  荧光素标记标记胰岛素抗体IgG   0.2ml
Anti-Insulin/FITC  荧光素标记胰岛素抗体IgG   0.2ml
Anti-Insulin(1-51 protein)/FITC  荧光素标记胰岛素1-51蛋白抗体IgG   0.2ml
Anti-Integrin alpha 1/CD49a/FITC  荧光素标记整