大鼠肾动脉平滑肌细胞实验方法

1.产品名称：大鼠肾动脉平滑肌细胞实验方法

2.组织来源：肾动脉组织

3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠肾动脉平滑肌细胞分离自肾动脉组织；肾动脉的分支为叶间动脉，穿行于肾柱内，上行至皮质与髓质交界处，形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出毛细血管，并向周围的肾小体发出入球小动脉，进入肾小囊后形成球形的毛细血管网，再汇集成出球小动脉，出肾小体。直小动脉分支形成毛细血管网，再汇合成直小静脉，入弓状静脉、叶间静脉，zui后汇合成肾静脉经肾门出肾，注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管，又是肾的机能血管，与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个毛细血管网：肾小球毛细血管网，血压较高，利于血浆滤过形成原尿；球后毛细血管网，血压较低，利于肾小管的重吸收。肾动脉平滑肌细胞是肾动脉的重要结构细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

本公司的大鼠肾动脉平滑肌细胞采用*-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17327 CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 7 (Grb7) 96T Rattus norvegicus (Rat)
氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17328 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
组蛋白H2B(H2B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17329 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Canis familiaris; Canine (Dog)
Ⅳ型胶原(COL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17330 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Capra hircus; Caprine (Goat)
糖皮质激素受体α(GRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17331 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Equus caballus; Equine (Horse)
糖皮质激素受体β(GRβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17332 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Chicken (Gallus)
1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17333 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Homo sapiens (Human)
高迁移率族蛋白17(HMG17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17334 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Mus musculus (Mouse)
胱天蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶(CAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17335 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
蛋白二硫键异构酶(PDI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) M17336 CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Rattus
Anti-Lysozyme   CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 )  软骨糖蛋白39（多肽） X57495  0.1ml
anti-LYVE-1   CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide  人癌胚抗原抗原 X57496  0.1ml
Anti-M2-PK    Cecropin  抗菌肽/天蚕素（多肽） X57497  0.1ml
Anti-Integrin αM/CD11b   HER2 receptor(erbB-2 isoform 2)  c-erbB-2受体抗原 X57498  0.1ml
Anti-ChRM1    ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3)  表皮生长因子受体3(抗原) X57499  0.1ml
Anti-MADCAM-1   C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4)  c-erbB-4癌基因抗原 X57500  0.2ml
Anti-MAG-a/b    CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)  囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原 X57501  0.1ml
Anti-MAG-a/L-MAG    CG6856-PA peptide  CG6856-PA抗原 X57502  0.1ml
Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein    CGA(Chromogranin A)  嗜铬粒素A抗原 X57503  0.2ml
Anti-MAPKK1    CGB(Chromogranin B)  嗜铬粒素B抗原 X57504  0.1ml
Anti-MAPKK2    ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor)  毒蕈碱型乙酰*受体M1抗原 X57505  0.1ml
Anti-Matriptase   ChRM3 peptide  毒蕈碱型乙酰*受体M3抗原 X57506  0.2ml
Anti-MBP    CK18(Cytokeratin 18)  细胞角蛋白18(多肽) X57507  0.1ml
Anti-MCP-1    CK18 peptide  细胞角蛋白18多肽抗原 X57508  0.1ml
Anti-M-CSF    CK18(Cytokeratin 18)  细胞角蛋白18抗原（C端） X57509  0.1ml
Anti-MDM2    CK14/17/42/10 peptide  细胞角蛋白14抗原 X57510  0.1ml
Anti-Megsin/SER—PINB7   CK16(Cytokeratin 16)  细胞角蛋白16抗原 X57511