人支气管上皮细胞实验方法

1.产品名称：人支气管上皮细胞实验方法

2.组织来源：支气管组织

3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

人支气管上皮细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由气管分出的各级分枝，由气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C”型的气管软骨为支架，而支气管不是。支气管上皮是气道与外界环境接触的*道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子，从而参与气道炎症及免疫反应。支气管上皮细胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纤维化以及一些感染性呼吸道疾病的发病机制中均起着重要的作用。体外培养的原代支气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。

本公司的支气管上皮细胞采用*-胶原酶混合消化法结合机械刮刷并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息：

M199、FBS、上皮细胞生长添加剂、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
信号传导转录激活因子6(STAT6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
信号传导转录激活因子5A(STAT5A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
信号传导转录激活因子4(STAT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Toll样受体2(TLR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
胰岛素(INS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
胱天蛋白酶7(CASP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
胱天蛋白酶7(CASP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
胱天蛋白酶7(CASP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
*4(KLK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
*4(KLK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
*4(KLK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
基质金属蛋白酶23B(MMP23B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
髓细胞触发受体1(TREM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
窖蛋白(CAV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Ⅰ型胶原α2(COL1α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Ⅰ型胶原α2(COL1α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Ⅰ型胶原α2(COL1α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
非神经元性烯醇化酶(NNE)检测试剂盒(酶联免疫吸附
MMP9  基质金属蛋白酶9 ACTH (7-23)  促肾上腺皮质激素ACTH (7-23)抗体  0.5mg
CD105/Endoglin  CD105蛋白 Actin α/alpha-SMA  肌动蛋白α(α-SMA)抗体  0.2mg
Mycobacterium bovis   牛结核杆菌菌体蛋白 Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α横纹肌辅肌动蛋白/α-SCA抗体  0.5mg
AMH/MIS  Muellerian抑制因子抗原 alpha Actinin 4  α-辅肌动蛋白4抗体  1mg
AEG-1 peptide  AEG-1抗原 F-Actin  纤维状肌动蛋白抗体  0.5mg
CD31 (PECAM-1)  血小板内皮细胞黏附分子-1（抗原） ACOT8  酰基*硫酯酶8  0.5mg
ADFP/ADRP/adipophilin   脂肪组织分化相关蛋白抗原 Agpat2  溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体  0.5mg
Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1  免疫球蛋白结合蛋白-1 AGPAT4  溶血磷脂酸酰基转移酶D抗体  0.5mg
CD133  造血干细胞抗原CD133 phospho-SYT1(Thr202)  磷酸化突触结合蛋白1抗体  0.5mg
CD133  造血干细胞抗原（多肽抗原） Synaptotagmin 1/SYT1  突触结合蛋白1抗体  0.5mg
H5N1-H5  H5亚型全病毒 phospho-SYT1(Ser309)  磷酸化突触结合蛋白1抗体  1mg
Newcastle disease virus  鸡新城疫疫苗（鸡瘟4型混合病毒） phospho-SYN1(Ser549)  磷酸化神经突触素1抗体  1ml
SDF-1/CXCL12  基质细胞衍生因子1 phospho-SYN1(Ser603)   磷酸化神经突触素1抗体  0.5mg
Bacillus anthraci  炭疽杆菌菌体蛋白 phospho-SYN1(Ser62+Ser67)  磷酸化神经突触素1抗体  0.5mg
ADCY1 peptide  腺苷酸环化酶1多肽抗原 AD7c-NTP  神经丝蛋白抗体  0.5mg
c-erbB-2蛋白  c-erbB-2蛋白（抗原） ADAMTS2  整合素样金属蛋白酶与*2型抗体  0.5mg
ChAT(Choline Acetyltransferase)  *乙酰转移酶（抗原） AD7C-NTP(human)  神经丝蛋白抗