黄曲霉B1 ELISA快速检测试剂盒
Aflatoxin B1 Test kit
（货号：Ounuo98001）
一、原理
黄曲霉B1 ELISA快速检测试剂盒, 本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中的残留物AFB1将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争AFB1抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物AFB1的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物AFB1的含量。
二、试剂盒特性
1） 试剂盒灵敏度： 0.02ppb
2）孵育温度： 25℃
3）孵育时间： 30min～15min
4) 样本检测下限
饲料 大米、玉米、花生、组织、食用油··········· 2 ppb
5) 交叉反应率
AFB1 ···· 99.9%
AFM1 ··· 6.6%
AFB2 ··· 83%
AFG1 ··· 107%
AFG2 ··· 42%
6) 样本回收
饲料 大米、玉米、花生、组织、食用油 ··· 95±35%
三、样本前处理步骤
1） 样本处理前须知
（a）实验中必须使用一次 头，吸取不同试剂时要更换吸头。
（b）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。
2）样本前处理需配制：
配液1 样本复溶液：
用去离子水将20×浓缩复溶液按1：19稀
释（1份20×浓缩复溶液+19份去离子水）。
配液2 样本提取液：
将 与去离子水按7:3比例混合均匀（7份 +3份去离子水）。
四、操作步骤
1、 从2～8℃冷藏环境中取出所需试剂，室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、 取出框架及需要数量的微孔，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。
3、 配液：将40ml浓缩洗涤液（20倍浓缩）用去离子水按照1：19稀释（1份浓缩洗涤液+19份去离子水），或按所需用量配制洗涤液。
4、 编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、 加标准品/样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗体工作液，用盖板膜盖板，轻轻振荡混匀，25℃环境反应30min。
6、 将孔内液体甩干，用稀释后的洗涤液250μl/孔洗板4～5次，每次间隔15～30秒，用吸水纸拍干（拍干后未清除的气泡可用干净的 头刺破）。
7、 显色：加入底物A液50μl/孔，再加入底物B液50μl/孔，轻轻振荡混匀，25℃环境中避光显色15min。
8、 测定：加入终止液50μl/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，5min内读数），测定每孔OD值。
