呕吐毒素ELISA快速检测试剂盒
Deoxynivalenol(don) elisa test kit
（货号：Ounuo98002）
一、原理
呕吐毒素ELISA快速检测试剂盒，本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中的残留物呕吐毒素将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗呕吐毒素抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物呕吐毒素的含量成负相关，与标准曲线比较即可得出相应残留物呕吐毒素的含量。
二、试剂盒特性
1） 灵 敏 度： 2ppb
2）孵育温度： 25℃
3） 孵育时间： 30min～15min
4） 样本检测下限
饲 料 ················ 300ppb
大米、玉米 ··············· 100ppb
花 生··················· 50 ppb
5）交叉反应率
呕吐毒素························ 99.9%
6） 样本回收率
饲料、大米、玉米 ··········· 90±30%
花 生 ··················· 100±30%
三、、样本前处理步骤
1) 样本处理前须知
（a）实验中必须使用一次 头，吸取不同试剂时要更换吸头。
（b）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。
2) 样本前处理需配制：
配液1 样本复溶液：
用去离子水将2×浓缩复溶液按1：1稀
释（1份2×浓缩复溶液+1份去离子水）。
配液2 样本提取液：
将 与去离子水按7:3比例混合均匀（7份 +3份去离子水）。
3) 样本处理：
（a）饲料样本处理方法：
1. 取1.0±0.05g研碎的样本于50ml离心管中；加入5ml样本提取液；
2. 充分振荡3min（或手摇5min以上），20℃ 4000r/min以上离心10min；
3. 取上清50μl，加入950μl样本复溶液，充分振荡混匀；
4. 取50μl用于分析。
样本稀释倍数：100倍
注：若测出样本中待测物含量已超出曲线范围，可把样本再做多倍稀释后进行检测（例如：取50μl上清液于新的离心管中，加入1450μl去离子水，稀释倍数150倍）。
（b）玉米、大米样本处理方法：
5. 取1.0±0.05g研碎的样本于50ml离心管中；加入5ml样本提取液；
6. 充分振荡3min（或手摇5min以上），20℃ 4000r/min以上离心10min；
7. 取上清100μl，加入900μl样本复溶液，充分振荡混匀；
8. 取50μl用于分析。
样本稀释倍数：50倍
注：若测出样本中待测物含量已超出曲线范围，可把样本再做多倍稀释后进行检测（例如：取50μl上清液于新的离心管中，加入950μl去离子水，稀释倍数100倍）。
（c）花生样本处理方法：
1. 取1.0±0.05g研碎的花生样本于50ml离心管中；加入5ml样本提取液，再加入4ml ；
2. 充分振荡3min（或手摇5min以上），20℃ 4000r/min以上离心10min；
3. 去掉上清，取中间层液体100μl，加入300μl样本复溶液，充分振荡混匀；
4. 取50μl用于分析。
样本稀释倍数：20倍
注：若测出样本中待测物含量已超出曲线范围，可把样本再做多倍稀释后进行检测（例如：取100μl中间层液体于新的离心管中，加入700μl去离子水，稀释倍数40倍）。
