细胞简介:
人椎间盘纤维环分离自椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚,而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带,后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3,其外层的细胞呈梭型,主要属于纤维细胞,内层细胞呈圆形,主要属于软骨细胞。在培养的情况下,用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现,它们的核较圆,核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多,为椭圆形,有的可看到双层单位膜,由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒,纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛,保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少,纤维环的生物性能就会减弱,椎间盘开始退变。
方法简介:
公司实验室分离的人椎间盘纤维环采用胶原酶-联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人椎间盘纤维环经Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 椎间盘组织 | 产品货号 | YS-01X7530 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品:
大鼠肌球蛋白轻链激酶(MYLK)试剂盒 ,英文名: MYLK ELISA Kit
Mouse tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA Kit 小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)试剂盒
RatPeosidineELISAKit 大鼠戊糖素(Peosidine)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFIIELISAKit大鼠Ⅱ
细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒20次
Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)试剂盒规格:96T/48T
小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)试剂盒 96T/48T
小鼠葡萄糖激酶(GCK)试剂盒 96T/48T
小鼠破骨细胞分化因子(ODF)试剂盒 96T/48T
小鼠皮质/上腺(CO)试剂盒 96T/48T
Dapper2蛋白抗体
小鼠神经激肽B(NKB)ELISA 试剂盒 96T/48T
Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)试剂盒
HumanPlaceaCadherin,P-cadELISAKit 人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)试剂盒 96T/48T 进口分装
GoatIerleukin10,IL-10试剂盒山羊白介素10(IL-10)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母菌ATP生物发光法定量试剂盒50次
MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit小鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)试剂盒规格:96T/48T
神经元,肌肉特异性烯醇化酶抗体
TF重组野猪 Transferrin / TF 蛋白 Protein
OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 0.5mlOLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原
TNFRSF10A重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 Protein
COL5A2 Protein Human 重组人 COL5A2 蛋白 (Fc 标签)
MMP8 Protein Mouse 重组小鼠 MMP8 / CLG1 蛋白
人椎间盘纤维环细胞OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 0.5mlOLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原
COL5A2 Protein Human 重组人 COL5A2 蛋白 (Fc 标签)
TF重组野猪 Transferrin / TF 蛋白 Protein
MMP8 Protein Mouse 重组小鼠 MMP8 / CLG1 蛋白
TNFRSF10A重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 Protein