细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介:
人直肠癌组织源分离自癌组织;癌(cancer)是指起源于上皮组织的恶性肿瘤,是恶性肿瘤中常见的一类。相对应的,起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名,如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症”习惯上泛指所有恶性肿瘤。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征,其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程,分为致癌、促癌、演进三个过程,与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。癌细胞,是一种变异的细胞,是产生癌症的病源。癌细胞与正常细胞不同,有无限增殖、可转化和易转移三大特点,能够无限增殖并破坏正常的细胞组织。癌细胞除了分裂失控外(能进行多极分裂),还会局部侵入周围正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。分恶性和良性两种。
方法简介:
公司实验室分离的癌组织源采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人直肠癌组织源经检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 直肠癌组织 | 产品货号 | YS-01X7470 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
公司正在出售的产品:
大鼠基质金属蛋白酶9(MMP9)试剂盒 ,英文名: MMP9 ELISA Kit
Mouse ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 大鼠αS转移酶(α-GST)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFAS/CD95ELISAKit大鼠凋亡相关因子
细胞甲戊二羟酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量试剂盒20次
RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒规格:96T/48T
小鼠趋化因子(mouse RAES) 作用: ELISA
小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用: ELISA
小鼠可溶性破骨细胞异化因子(mouse sRANKL) 作用: ELISA
小鼠血清淀粉样蛋白(mouse SAA) 作用: ELISA
ARCH抗体
小鼠神经营养因子3(-3)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain (IgH) ELISA Kit 重链(IgH)试剂盒
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)试剂盒 96T/48T 进口分装
Fishi-iodothyronine,T3试剂盒鱼类三甲状腺原(T3)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母非蛋白/游离巯基含量比色法定量试剂盒20次
MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)试剂盒规格:96T/48T
溶质载体家族蛋白20成员A1抗体
NA重组甲型流感 H3N2 神经酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
PSCA 前列腺干细胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干细胞抗原
NOG重组人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
COASY Protein Human 重组人 COASY / CoA synthase 蛋白
EPHB6 Protein Human 重组人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 标签)
人直肠癌组织源细胞PSCA 前列腺干细胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干细胞抗原
COASY Protein Human 重组人 COASY / CoA synthase 蛋白
NA重组甲型流感 H3N2 神经酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
EPHB6 Protein Human 重组人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 标签)
NOG重组人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。