细胞简介:
人牙龈成纤维分离自牙龈组织;牙龈指紧贴于牙颈周围及邻近的牙槽骨上淡红色的结构,由复层扁平上皮及固有层组成。是口腔黏膜的一部分,血管丰富,呈淡红色,坚韧而有弹性,因缺乏黏膜下层,直接与骨膜紧密相连,故牙龈不能移动。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介:
公司实验室分离的人牙龈成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人牙龈成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 牙龈组织 | 产品货号 | YS-01X7695 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次;
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品:
大鼠热休克转录因子4(HSF4)试剂盒 ,英文名: HSF4 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor B (VEGF-B) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)试剂盒
RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit豚鼠卵清蛋白特异性IgG
细胞长链脂酰合成酶(ACYLCOASYHETASE)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次
Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)试剂盒规格:96T/48T
小鼠神经营养素4 英文名称: Neuroophin-4 英文缩写: -4
小鼠神经酸酶 英文名称: Mouse Neidase 英文缩写: NEU
小鼠8羟基脱氧鸟苷 英文名称: Mouse 8-hydroxy-2'-desoxyguanosine 英文缩写: 8-OHDG
小鼠嗅素4 英文名称: Mouse Olfactomedin 4 英文缩写: OLFM4
AF750标记的促甲状腺素受体抗体(C端)
小鼠双氢睾酮(DHT)ELISA 试剂盒 96T/48T
Measles virus (MV) ELISA Kit 人麻疹病毒(MV)试剂盒
Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
DuckIerleukin6,IL-6试剂盒鸭白介素6(IL-6)试剂盒规格:96T/48T
枣椰树(datepalm)培养基500毫升溶液/片剂
MouseDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit小鼠脱氢表雄同S7(DHEA-S7)试剂盒规格:96T/48T
耳聋常染色体显性遗传相关蛋白3抗体
IL1B重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签) Protein
HO-2(Heme oxygenase 2 0.5mgHO-2(Heme oxygenase 2) 血红素氧合酶-2抗原
SGK3重组人 SGK3 / SGKL 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CLEC6A Protein Human 重组人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (Fc 标签)
IL1R1 Protein Mouse 重组小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白
人牙龈成纤维细胞HO-2(Heme oxygenase 2 0.5mgHO-2(Heme oxygenase 2) 血红素氧合酶-2抗原
CLEC6A Protein Human 重组人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (Fc 标签)
IL1B重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签) Protein
IL1R1 Protein Mouse 重组小鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白
SGK3重组人 SGK3 / SGKL 蛋白 (His & GST 标签) Protein