细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介:
人胎盘间充质分离自胎盘组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素,是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。胎盘间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一种多能干细胞,是具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞像APSC多能细胞。在胚胎发育中来源于中胚层。在机体正常的组织损伤修复过程中,MSC是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损伤引起的特殊信号作用下,MSC迁移到受损部位,在局部聚集增殖,依据不同的损伤信号沿着不同途径分化。MSC易于分离扩增,体外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一种实用的组织修复种子细胞。相较于其他干细胞,胎盘间充质干细胞具有来源方便,细胞数量充足,易于分离、培养、扩增和纯化,传代扩增多代后仍具有干细胞特性。胎盘是干细胞的佳来源。
方法简介:
公司实验室分离的人胎盘间充质干采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人胎盘间充质干经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 胎盘组织 | 产品货号 | YS-01X7607 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
公司正在出售的产品:
大鼠糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(GI)试剂盒 ,英文名: GI ELISA Kit
Niu Shousu (LEP) ELISA Kit 牛瘦素(LEP)试剂盒
RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 大鼠脱轻表雄酮硫酸酯(DHEA-S)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHMGB-1ELISAKit大鼠高迁移率族蛋白B1
细胞PKCι激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitE-Cad大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白
小鼠天冬酸基转移酶试剂盒 小鼠天冬酸基转移酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠天冬酸基转移酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠天冬酸基转移酶试剂盒、小鼠天冬酸基转移酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒 小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒、小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠正常T细胞表达试剂盒 小鼠正常T细胞表达试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠正常T细胞表达试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠正常T细胞表达试剂盒、小鼠正常T细胞表达eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒 小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒、小鼠脂蛋白相关0脂酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
血红蛋白ζ链/Hemoglobin ζ 抗体
小鼠铁调素(Hepcidin)试剂盒 96T/48T
Rat melanocyte aibody (MC Ab) ELISA Kit 大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)试剂盒
HumanglycolipidaoaibodyELISAKit 人抗糖脂抗体(glycolipid)试剂盒 96T/48T 进口分装
Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCA试剂盒鸡弓形虫循环抗原(TCA)试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞RHO蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
MousefactorB,BFELISAKit小鼠B因子(BF)试剂盒规格:96T/48T
Pacific Blue标记人CD57单克隆抗体
LGMN重组小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽)
PARP3重组人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CFL2 Protein Human 重组人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
VSIG4 Protein Mouse 重组小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 标签)
人胎盘间充质干细胞CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽)
CFL2 Protein Human 重组人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
LGMN重组小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
VSIG4 Protein Mouse 重组小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 标签)
PARP3重组人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。