细胞简介:
人前列腺平滑肌分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素”。前列腺平滑肌细胞是前列腺的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。前列腺平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介:
公司实验室分离的人前列腺平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人前列腺平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 前列腺 | 产品货号 | YS-01X7089 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品:
大鼠多巴胺D2受体(D2R)试剂盒 ,英文名: D2R ELISA Kit
Porcine heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 猪热休克蛋白40(HSP-40)试剂盒
蟹特定基因序列(Cytb)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforLTE4ELISAKit大鼠白三烯E4
体液总抗氧化能力(TAC)化学发光法定量试剂盒50次
ELISAKitCA鸡酶
小鼠脂肪酸合成酶 英文名称: Mouse Fatty Acid Syhase 英文缩写: FAS
小鼠促卵泡生成激素 英文名称: Mouse Follicle Stimulating Hormone 英文缩写: FSH
小鼠卵泡休止素 英文名称: Mouse Follistatin 英文缩写: FST
小鼠叉头框蛋白O3 英文名称: Mouse Forkhead Box protein O3 英文缩写: FOXO3
β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体
小鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human soluble tumor necrosis factor (sTNF a R) ELISA Kit 人可溶性坏死因子α受体(sTNFαR)试剂盒
Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit 人17羟皮质类固醇(17-OHCS)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor1,3-BetaD-GluELISAKit大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶
饮料糖精(saccharin)含量薄层色谱法定性试剂盒20次
Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)试剂盒规格:96T/48T
PE标记人CD47单克隆抗体
REG1B重组食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 标签) Protein
IRAK 2 白介素-1受体相关激酶2 0.5mgIRAK 2 白介素-1受体相关激酶2
EPOR & CD131重组人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein
CD27 Protein Human 重组人 CD27 / TNFRSF7 蛋白
RETN Protein Mouse 重组小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 标签)
人前列腺平滑肌细胞IRAK 2 白介素-1受体相关激酶2 0.5mgIRAK 2 白介素-1受体相关激酶2
CD27 Protein Human 重组人 CD27 / TNFRSF7 蛋白
REG1B重组食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 标签) Protein
RETN Protein Mouse 重组小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 标签)
EPOR & CD131重组人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein