产品属性:
产品名称：铜绿假单胞菌快速检测试剂盒48T 货号：FS-02R6331 规格：48T 分类：恒温荧光法 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔） 2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液：1×20ml。 4、 检测稀释液A：1×10ml。 5、 检测稀释液B：1×10ml。 |
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
N-Fmoc-S-三甲基-D-半胱氨 98%灭蝇标准溶液 10μg/ml,u=2%大鼠Rho相关GTP结合蛋白RhoE 免疫试剂盒
FMOC-L-谷氨酰五基酯 98%草津 分析标准品，98%大鼠Rho鸟交换因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)免疫试剂盒
N-α-Fmoc-N-γ-三甲游基-L-谷氨五酯 97%霜脲 分析标准品，98.5%大鼠Ras相关蛋白Rab-11A 免疫试剂盒
N-Fmoc-N'-三甲基-D-谷氨酰 98%顺式菊酯 分析标准品，99%大鼠Ras相关C3肉底物1(RAC1)免疫试剂盒
芴甲氧羰基-L-谷氨 1-叔丁酯 98%四螨 分析标准品，98.6%大鼠P选择(P-Selectin/CD62P)免疫试剂盒
N-[(9H-芴-9-氧基)羰基]-L-谷氨-5-叔丁基-1-五酯 98%四螨标准溶液 100μg/ml,u=4%大鼠P物质受体(SP-R)免疫试剂盒
Fmoc-His(MMt)-OH 98%四螨标准溶液 10μg/ml,u=6%大鼠P物质(SP)免疫试剂盒
N-芴甲氧羰基-N'-三甲基-D-组氨 98%灭幼脲 分析标准品，97%大鼠P53(P53)免疫试剂盒
FMOC-L-亮氨五基酯 98%灭幼脲标准溶液 100μg/ml,u=4%，酮大鼠P27蛋白(P27)免疫试剂盒
N-芴甲氧羰基-N'-叔丁氧羰基-L-赖氨五酯 98%灭幼脲标准溶液 10μg/ml,u=6%，酮大鼠P21蛋白(P21)免疫试剂盒
N'-叔丁氧羰基-N-芴甲氧羰基-D-赖氨五基酯 98.5% 分析标准品，99%（剧品）大鼠P0蛋白抗体(IgG)免疫试剂盒
N-芴甲氧羰基-N'-2,4-二基-L-赖氨 98.5%标准溶液 100μg/ml,u=3%（剧品）大鼠P0蛋白(p0)免疫试剂盒
N,N'-双芴甲氧羰基-L-赖氨 98.0%标准溶液 10μg/ml,u=6%（剧品）大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨(AcSDKP)免疫试剂盒
N,N'-双(芴甲氧羰基)-L-赖氨五基酯 98.5%苄草隆 分析标准品,99.5%大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)免疫试剂盒
Fmoc-N'-甲基三甲基-L-赖氨 98%丁硫溶液100μg/ml,溶剂:酮大鼠N-甲基-D-天门冬氨(NMDA)受体亚单位NR2 免疫试剂盒
铜绿假单胞菌快速检测试剂盒48T人乙酰肝（HPA）ELISA试剂盒,HPA ELISA kit2-乙酰基-3-甲基吡周期M2抗体
人抗存活抗体/生存蛋白（Surv）ELISA试剂盒,Surv ELISA kit2-乙酰基-3-甲基吡周期T2抗体
人抗肌内膜抗体IgA（EMA IgA）ELISA试剂盒,EMA IgA ELISA2-乙酰基-3-甲基吡周期K抗体
人衣原体蛋白样活性因子（CPAF）ELISA试剂盒, CPAF ELISA2,3-二甲基喹喔啉抗菌肽CAMP抗体
人流感病抗体IgG（FLU）ELISA试剂盒,FLU ELISA2,3-二甲基喹喔啉5号染色体开放阅读框4抗体
人雌激受体（ER）ELISA试剂盒,ER ELISA6-硝基-2,3-二羟基喹喔啉4号染色体开放阅读框44抗体
人3-羟基-3-甲基戊二酰辅A合1（HMGCS1）ELISA试剂盒,HMGCS1 ELISA6-硝基-2,3-二羟基喹喔啉4号染色体开放阅读框33抗体
人磷烯醇式丙酮羧激（PCK）ELISA试剂盒,4-羟基吲哚4号染色体开放阅读框42抗体
使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。
