特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
产品属性:
产品名称:狗源性成分快速检测试剂盒48T 货号:FS-02R6385 规格:48T 分类:恒温荧光法 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。 |
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
4-羟基硫代甲酰 98%迷迭香 97%前颗粒体蛋白检测试剂盒
4-羟基-3-乙酮 98%左旋延胡索乙 分析标准品,≥98%(HPLC)有凸1检测试剂盒
3-吡啶 98%红景天 分析标准品,≥97.5%(HPLC)磷化tau—181蛋白检测试剂盒
对异基 98%丹酚A 分析标准品,≥98%PTEN;MMAC1检测试剂盒
4-异基硫酚 96%丁香 98%P糖蛋白;渗透性糖蛋白检测试剂盒
2-异基硫酚 90%D(-)-水杨 98%P物质检测试剂盒
2--5-甲基噻吩 97%D(-)-水杨 分析标准品,≥98%P物质受体检测试剂盒
3- 99%青藤 97%P选择检测试剂盒
异烟 99%丁香 98%Rho关联含卷曲螺旋蛋白激1检测试剂盒
2-噻吩 97%番泻叶A 分析标准品,≥96%Rho关联含卷曲螺旋蛋白激2检测试剂盒
劳森试剂 97%(-)-鹰爪豆 >98.0%(GC)Rho关联含卷曲螺旋蛋白激5检测试剂盒
3-硫酚 97%番泻B 分析标准品,≥97%(HPLC)RNA结合基序蛋白6检测试剂盒
4-巯基甲 99%辛弗林 98%RNA聚合转录终止因子Ⅰ检测试剂盒
4-(甲硫基) 98%茄尼 96%R-脊椎蛋白2检测试剂盒
2-硫酚 97%S-腺甲硫氨对甲磺盐 80%S100A11钙结合蛋白检测试剂盒
狗源性成分快速检测试剂盒48T人血管性血友病因子/瑞斯托霉辅因子(VWF)ELISA试剂盒,代磷二酯膜二肽3抗体
人转甲状腺蛋白(TTR)ELISA试剂盒,代磷二酯双特异性磷13抗体
人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒,4-(4-吗啉代)DIM-7蛋白抗体
人抗菌肽(Att)ELISA试剂盒,4-(4-吗啉代)核糖核Dicer抗体
豚鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒,4-(4-吗啉代)内皮和平滑肌衍生的神经纤毛蛋白抗体
兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒,2,2,4-基-1,3-戊二单异丁酯含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族2抗体
兔子白介9(IL-9)ELISA试剂盒,2,2,4-基-1,3-戊二单异丁酯DNA连接1抗体
牛丙酮检测(acetone)ELISA试剂盒,庚酰DHH蛋白抗体