当前位置:上海抚生实业有限公司>>PCR快速检测试剂盒>>纯化试剂盒>> 石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒32次/盒
货号 | FS-02R9515 |
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产品属性:
产品名称:石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒32次/盒 规格:32次/盒 分类:纯化试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。 |
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
玉米淀粉 药用级氧化铌 SP高分子量清蛋白检测试剂盒
碳二乙酯 99%铌粉 99.95% metals basis,325目麦溶蛋白检测试剂盒
碳二甲酯(DMC) 98%碳化铌 99%,2-4μm羟基自由基检测试剂盒
碳二甲酯(DMC) 99%硫钕 SP柠檬检测试剂盒
2,7-二溴芴 98%硫钕 99.99%镁原卟啉Ⅸ检测试剂盒
多聚甲 AR,95.0%化钕 99.99%5-氨基乙酰检测试剂盒
多聚甲 96%氧化镨 99.9% metals basis唾液检测试剂盒
聚(甲基氢硅氧烷) 粘度:15 - 40 mPa.s (20°C)氧化镨 50nm 球形,99.5%氧化还原4检测试剂盒
红色氧化铅 AR,95%氧化镨 99.999% metals basis环磷鸟检测试剂盒
黄色氧化铅 AR,99.0%硝镨 99% NADH还原检测试剂盒
黄色氧化铅 99.999% metals basis硝镨 99.9% metals basis色C还原检测试剂盒
黄色氧化铅 ACS, 99.0%硝镨 99.99% metals basis布鲁东氏酪氨激检测试剂盒
黄色氧化铅 99.9% metals basis金属镨 99%,粒状铜锌超氧化物歧化检测试剂盒
黄色氧化铅 99.99% metals basis金属镨 粉末,99.9% metals basisL-天冬氨氧化检测试剂盒
巴豆 98%金属镨 锭, 存放于油中,99.9% metals basis交替氧化检测试剂盒
石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒32次/盒 烯, CP,>98%(GC)钙 99.98% metals basisIL-6 白介-6
烯, GR,>99.5%(GC)L-精盐盐 EP, JP, USP 级,≥98.5%,用于培养sIL-6R/gp130 可溶性白介-6受体
烯丁酯(BA) GCS,≥99.5% (GC)L-精 98%IL-8 白介-8
烯丁酯 AR,99%L- 99%IL-10 白介-10
烯丁酯 CP,98%L-天门冬 99%IL-11 白介-11
烯丁酯 分析标准品,>99.5% (GC)L-天门冬 用于或植物培养, ≥99% (T)IL-12 白介-12
烯异辛酯 >99.0%(GC)L-精 非动物源,EP, JP, USP ;用于培养,98.5 to 101.0IL-13 白介-13
烯异辛酯 分析标准品,≥99.5% (GC)L-谷 99%IL-14(human) 白介-14
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
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