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ELISA实验包被过程讲解2025/4/27
包被是ELISA实验第一步，也是比较关键的一步。ELISA包被是指将抗原或抗体结合到固相载体表面的过程，也称为固相化。1、选择合适的包被抗原包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原。天然蛋白直接从...
免疫荧光技术直接法优缺点2025/4/15
免疫荧光（immunofluorescencetechnic）以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）。直接法是荧光抗体技术z...
原代细胞的提取操作过程2025/4/7
原代细胞是指直接从机体取出的安排或细胞获得单个细胞并在体外进行培育的细胞。这里主要指：安排器官、外周血及胚胎等。由于原代细胞成长缓慢，繁衍必定的代数中止成长。所以一般认为：培育的原代的1代和传代到10...
抗原抗体反应特异性解读2025/4/3
抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBe...
ELISA试剂盒实验结果必看干货2025/3/24
定性和定量是ELISA测定按其表示测定结果的方式分为的两大类。定性测定是对标本中是否存在待测抗原或抗体作出结论，分别用“阳性"和“阴性"来表示。由此可见传染性病原体的抗原或抗体通常是用的定性测定，以此...
泽泻探针法PCR鉴定试剂盒试验循环参数2025/3/17
泽泻探针法PCR鉴定试剂盒试验循环参数：1.预变性（Initialdenaturation）模板DNA变性与PCR酶的激活对PCR能否成功至关重要，建议加热时间参考试剂说明书，一般未修饰的Taq酶激活...
细胞冻存样本复温与检测流程2025/3/11
冻存样本复温与检测流程：1.解冻步骤‌：从-80℃/-20℃转移至4℃冰箱，缓慢解冻（推荐过夜）.禁止‌：室温快速解冻或水浴加热（易导致蛋白变性或细胞碎片增加）。2.离心处理‌：解冻后样本需3000×...
ELISA试验手工洗涤操作2025/3/3
ELISA试验手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种方法：一、浸泡式1.吸干或甩干孔内反应液；2.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；3.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1～2分钟，间歇摇动，浸泡...
多克隆抗体及单克隆抗体的制备2025/2/24
1、多克隆抗体的制备：①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说，皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多；皮内免疫法所需的抗原量少，在抗原宝贵时特...
实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）反应主要步骤2025/2/17
实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是一种用于实时扩增和检测特定DNA或RNA序列的分子生物学技术。该方法利用荧光染料或探针，当与扩增的DNA或RNA分子结合时会发出信号，从而可以对目标序列进行量化。...
实验室进行预实验原因2025/2/10
如何进行预实验？为什么要进行预实验？1、选择2~3个预期结果差异比较大的样品，严格按照说明书进行操作，注意仪器工作状态，操作规范，控制好测定条件，尤其是时间和温度。2、预实验的目的是：①确定该试剂盒是...
ELISA实验标准曲线的技术解答2025/2/5
ELISA实验标准曲线的技术解答：1.设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准...
PCR反应引物设计的基本原则2025/1/20
PCR反应中有两条引物，即5′端引物和3′引物。设计引物时以一条DNA单链为基准（常以信息链为基准），5′端引物与位于待扩增片段5′端上的一小段DNA序列相同；3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段...
原代细胞和传代细胞培养比较2025/1/13
一、定义方面：1、原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的第1次培养，也叫初代培养。2、传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。对单层培养而言，80%...
影响抗原抗体反应主要因素有什么2025/1/6
抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行，也可以在机体外进行。抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化，包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段，...
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