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细胞冻存主要操作步骤2024/6/12
细胞冻存主要操作步骤：1、选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天*换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%yi蛋白酶消化。适时去掉yi蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上...
RT-PCR实验提高逆转录保温温度方法2024/6/3
较高的保温温度有助于RNA二级结构的打开，增加了反应的产量。对于多数RNA模板，在没有缓冲液或盐的条件下，将RNA和引物在65℃保温，然后迅速置于冰上冷却，可以消除大多数二级结构，从而使引物可以结合。...
荧光定量PCR试剂盒反应特异性提高的方法2024/5/27
荧光定量PCR试剂盒反应特异性提高的方法：1.引物的设计引物最好在模板cDNA的保守区设计，长度15-30bp，GC含量小于60%，3’端不超过连续三个G或C，碱基分布错落有致，避免引物自身形成二聚体...
抗原抗体反应特性说明2024/5/20
抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行，也可以在机体外进行。在机体内，当免疫细胞被抗原激活后，由B细胞分化成熟为浆细胞后所合成、分泌的一类能与相应抗原特异性...
ELISA测定实验条件阐述2024/5/13
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。ELISA实验检测具备条件阐述：1...
逆转录-聚合酶链反应 （RT-PCR） 实验方法原理2024/5/6
逆转录-聚合酶链反应（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction,RT-PCR）的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oli...
ELISA试验手工洗涤操作过程2024/4/28
洗涤在ELISA试验过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA试验就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反...
细胞传代问题分析2024/4/22
细胞传代问题分析：1、传代密度过高一旦细胞养太久至融合度过高(90%)才传代，容易使细胞产生老化现象，甚至是堆叠，再消化细胞时不易吹打成单颗细胞，即便再重新铺盘传代，细胞也无法回到原本的特性了。(如：...
大鼠肺动脉内皮细胞培养实验步骤2024/4/15
大鼠肺动脉内皮细胞培养实验步骤：1、取7-10d雄性SD大鼠，颈椎脱臼处死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。2、在超净工作台中，将大鼠断头置于玻璃培养皿中，打开颅腔后取出全脑,放在盛有预冷的PBS玻...
常见的PCR反应浅析2024/4/8
常见的PCR反应浅析如下：1、常规PCR：直接PCR是指直接从样品扩增目标DNA，无需进行核酸分离纯化。2、热启动PCR：热启动PCR常用于增强PCR扩增的特异性。该方法主要利用抗体、亲合配体、适体或...
肠球菌通用PCR检测试剂盒实验步骤2024/3/29
肠球菌通用PCR检测试剂盒实验步骤：1、产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其全溶解。2、两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振...
标准物质的五大特性类2024/3/25
标准物质的特性分为五大类：1、化学成分类：标准物质，纯的化合物或是有代表性的基体样品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作农药残留分析的添加了杀虫剂的动物脂肪)，以一种或多种化学或物理化学特性值表征。...
ELISA试验避免血清沉积方法2024/3/18
ELISA试验避免血清沉积方法：1、冻结血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，削减沉积的发作。2、血清分装冻存时，须规矩摇晃均匀（当心勿形成气泡），使温度与成分均一。3、勿直接由-20℃直接至...
小鼠ELISA试剂盒结果的判定2024/3/11
小鼠ELISA试剂盒结果的判定：1、结果的判定严格依据试剂盒提供的阳性判定值（CO）进行结果判定。厂商提供试剂的同时，说明书上列出的CO值是建立在一系列科学试验及统计研究的基础上，不应随意更改。定量测...
冷冻细胞活化具体过程2024/3/4
冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。收到细胞株包...
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