【ConA-琼脂糖凝胶4B】参数_适用范围_作用_使用方法_注意事项

【ConA-琼脂糖凝胶4B】参数说明_适用范围_作用_使用方法_注意事项等咨讯由上海远慕生物介绍，我们所供应的琼脂糖凝胶系列特别多，价格也很便宜，如有需要，欢迎订购!为了满足客户的需求，我们还配有ELISA试剂盒，标准品对照品，动物血清，培养基，抗体，抗原，生化试剂，化学试剂，生物分子，溶液，实验耗材及其他试剂销售。

【ConA-琼脂糖凝胶4B参数说明】

中文名：ConA-琼脂糖凝胶4B

英文名：ConA Sepharose 4B

供应商：上海远慕

规格：25ml、100ml

操作温度：4-40℃

结构成分：4%交联琼脂糖

配基偶联量：40μmol phenyl/ml 凝胶

保存条件：4℃

性状：白色微球，凝胶状，保存在20%酒精溶液中

应用：疏水层析介质，适合含芳香族配体蛋白纯化，特别适合单抗的纯化等

【ConA-琼脂糖凝胶4B适用范围】

ConA琼脂糖凝胶用于各种带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂的分离纯化。

【ConA-琼脂糖凝胶4B作用】

ConA-琼脂糖凝胶4B是将伴刀豆球蛋白(ConA)偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上，该填料具有很高的化学稳定性。ConA能和各类带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂，所以ConA琼脂糖凝胶可以用于这类物质的分离纯化。

【ConA-琼脂糖凝胶4B6FF使用方法】

1、乙醇浸泡：在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干。

2、无盐水浸泡：室温下，在无盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的*溶胀。

3、盐酸浸泡：在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗只中性。

4、将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层。

5、上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可。

7、洗脱方法：可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化。

8、在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

【ConA-琼脂糖凝胶4B注意事项】

1、该凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温，然后再装柱，以免产生气泡影响柱效。

2、吸附：10-30Tris-HCl缓冲液，pH7.5，其中含有0.2MNaCl，2mMMnCl2，2mMCaCl2。平衡10个柱子床体积。

3、洗脱：可以用pH4.5-6的缓冲液洗脱，也可以用100-500mM糖类竞争线性或阶段洗脱，例如用甲基葡萄糖等甲基吡喃糖，其中缓冲液可以是10-30Tris-HCl缓冲液，pH7.5，含有0.2MNaCl.洗脱zui多可以到10个柱床体积。

4、上样样品必须与平衡柱子的缓冲液pH、电导相同。

5、ConA琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法：先用0.1MTris-HClpH8.5缓冲液洗含0.2MNaCl洗10个柱床体积，然后用20mM醋酸缓冲液，pH4.5洗3个床体积,zui后用20%乙醇洗3个床体积即可。

6、对于吸附力强的物质可以用0.1M硼酸盐缓冲液，pH6.5低流速洗3-5个柱床体积。也可以用乙醇线性洗脱20-50%。

7、该亲和填料保存条件为20%乙醇，+4~8℃。

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