羧甲基-琼脂糖凝胶 FF操作步骤

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羧甲基-琼脂糖凝胶 FF参数说明

中文名：羧甲基-琼脂糖凝胶 FF

英文名：CM Sepharose FF

供应商：上海远慕

规格：100ml、500ml

凝胶类型：离子交换填料，弱酸型

结构成分：6%交联琼脂糖

粒径： 45-165μm

配基基团：carboxymethyl(羧甲基)

总离子交换量：0.09-0.13mmol/g凝胶

工作PH值：6-10

操作温度：4-40℃

性状(以下信息仅供参考)：含20%乙醇，底部为乳白色胶体。

用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)适用于各种带阳性电荷生物大分子的浓缩纯化等。

保存：2～8℃

羧甲基-琼脂糖凝胶 FF

羧甲基-琼脂糖凝胶 FF操作步骤

1、装柱

凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高，为了保证分离效果，一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶，或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。

以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子，可在柱床稳定后将柱床压紧，接好管路。让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。

选择一根一定直径的柱子，长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍)，清洗掉20%乙醇，抽干，用缓冲液(按凝胶：缓冲液=3：1的比例)配成匀浆。不要剧烈搅动，以免搅坏微球。

将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜)，务必使底端无气泡。用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。

打开蠕动泵，让缓冲液缓慢流过，使柱床稳定。用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平，上好柱头。

2、平衡

让缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。

3、上样

样品用缓冲液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理，再上样。介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的，分子量大的先流出来。上样体积约为柱体积的1~2%，越小分离越好。

4、洗脱

用缓冲液洗脱，洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。

5、再生

一般用缓冲液洗到平衡，可再次使用。

6、注意

在装柱、使用和保存柱子的时候，始终要避免柱子流干气泡进入。

羧甲基-琼脂糖凝胶 FF操作注意事项

1、密封贮存于4°C-28°C(保存溶液为20%乙醇)，通风、干燥的地方，不能冷冻;用过的柱子贮存于4°C(20%乙醇)。

2、在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

3、在实验过程中，请严格遵循产品说明书上的要求进行操作。

4、本产品避免与氧化剂接触;避免长时间暴露在空气中。

5、保质期：5年。

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