DEAE-琼脂糖凝胶 FF使用说明书

时间：2018/3/9阅读：3511

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DEAE-琼脂糖凝胶 FF参数说明

中文名：DEAE-琼脂糖凝胶 FF

英文名：DEAE Sepharose FF

供应商：上海远慕

规格：100ml、500ml

粒径：45~165μm

工作温度：4~40℃

流速：300~600 cm/h;zui大流速750 cm/h　　　

耐热：pH7水中120℃30min

耐压：0.3 MPa

形状：球形

性状：本品呈白色，球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

保存：密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇)，通风、干燥、清洁的地方；不能冷冻。

注意事项：本产品避免与氧化剂接触;避免在pH值< 4时长时间暴露(一周,20℃)。

保质期：5年

DEAE-琼脂糖凝胶 FF使用说明书

DEAE-琼脂糖凝胶 FF

DEAE-琼脂糖凝胶 FF应用范围

DEAE-琼脂糖凝胶FF是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质；广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。DEAE-琼脂糖凝胶FF是一种将*胺基烷基季铵基键合在琼脂糖凝胶微球上形成的带有强碱阴离子基团的层析分离介质；该产品保留了琼脂糖*的亲水性及大网架结构，与生物活性大分子有很好的相容性，具有离子交换容量高、非特异性吸附少、流速快等特点，广泛用于蛋白质、核酸、多肽及多糖等生物大分子的实验室规模制备和生物制药、生物工程的工业化制备。

DEAE-琼脂糖凝胶 FF使用步骤

1、乙醇浸泡：在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干;

2、无盐水浸泡：室温下，在无盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的*溶胀，然后;

3、盐酸浸泡：在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗只中性;

4、将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层;

5、上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);

6、凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可;

7、洗脱方法：可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化;

8、在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

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