琼脂糖凝胶CL-4B操作注意事项

上海远慕生物详细介绍琼脂糖凝胶CL-4B的操作步骤，注意事项及其他参数说明，我们现货为客户提供琼脂糖凝胶CL-2B，琼脂糖凝胶2B，葡聚糖凝胶 G-200，葡聚糖凝胶 G-100，琼脂糖凝胶4FF，琼脂糖凝胶6FF及其他糖凝胶系列，价格实惠，如有需要，欢迎订购!

琼脂糖凝胶CL-4B参数说明：

中文名：琼脂糖凝胶CL-4B

英文名： Sepharose CL-4B

供应商：上海远慕

规格：100ml、500ml

基质：4%

操作温度：室温

颗粒大小：45-165μm

配基密度：40μmol/mL

每毫升结合量：15-20mgHSA

琼脂糖凝胶配基：正丁烷基n-Octyl

性状：本品为乳白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质

应用：蛋白、大分子复合物、病毒、核酸、多糖的分离、分子量测定等

适用范围：限于科研实验，不作临床

琼脂糖凝胶CL-4B操作流程

琼脂糖凝胶CL-4B操作步骤：

1、装柱凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高，为了保证分离效果，一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶，或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子，可在柱床稳定后将柱床压紧，接好管路。

2、平衡

让缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。

3、上样

样品用缓冲液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理，再上样。

介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的，分子量大的先流出来。

上样体积约为柱体积的1~2%，越小分离越好。

4、洗脱

用缓冲液洗脱，洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。

5、再生

一般用缓冲液洗到平衡，可再次使用。

6、注意

在装柱、使用和保存柱子的时候，始终要避免柱子流干气泡进入。

7、去热源用0.5M的氢氧化钠清洗柱子5~6小时或用0.1M的氢氧化钠24小时。或用以下方法步骤去除：

a、2倍柱体积的70%乙醇；

b、2倍柱体积50mMTris-HClpH7.5；

c、1倍柱体积4M尿素；

d、3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1MNacl;以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。

琼脂糖凝胶CL-4B注意事项：

1、不同配基的偶联方法与上面类似，但是反应的条件例如：配基加入量，反应时间，反应温度应根据配基的不同进行适当的调整;

2、可用碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液做为偶联缓冲液，但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的缓冲液。

3、产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20%乙醇)，通风、干燥、清洁的地方。

4、不能冷冻。

5、用过的柱子贮存在4℃(20%乙醇)。

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