产品名称 | 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用说明书 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用说明书
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C9
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用说明书复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用说明书操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
人的牛血清白蛋白(BSA)免疫试剂盒 Human bovine serum albumin,BSA ELISA kit
人蛋白磷酸酶1调控/抑制因亚基1A(PPP1R1A)免疫试剂盒 Human protein phosphatase 1 regulatory subunit A,PPP1R1A ELISA Kit
人蛋白*磷酸酶自身抗体免疫试剂盒 Human Tyrosine Phosphatase Autoantibodies ELISA Kit
人蛋白*磷酸酶1B(PTP1B)免疫试剂盒 Human protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B ELISA Kit
人蛋白聚糖4(PRG4)免疫试剂盒 Human PRG4 ELISA Kit
人蛋白*脱亚氨酶4(PADI4)免疫试剂盒 Human PADI4 ELISA kit
人蛋白*甲基转移酶1(PRMT1)免疫试剂盒 Human PRMT1 ELISA Kit甲基丙烯酸正丁酯 Butyl methacrylate 97-88-1
甲基橙;金莲橙D;对二甲基氨基偶氮苯磺酸钠 Methyl orange;Gold orange;Helianthine B;Tropaeolin D;SodiuM p-diMethyl-aMinoazobenzene sulfonate;4-{[4-(DiMethylaMino)phenyl]azo} benzene sulfonic acid sodiuM salt;p-DiMethyl-aMinoazobenzene sodiuM sulfonate;C.I.13025 547-58-0
甲基硅油 I Methyl silicone I
甲基红百里酚蓝 NA
甲基环己烷;六氢;环己基甲烷 Methylcyclohexane;CyclohexylMethane;Toluenehexahydride 108-87-2
甲基锂 METHYLLITHIUM 917-54-4
甲基氯化镁 Methylmagnesium chloride 676-58-4
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用说明书甲基三苯溴化磷 Methyltriphenylphosphonium bromide 1779-49-3
甲基*氧基硅烷 Trimethoxy(methyl)silane 1185-55-3
三氯甲基硅烷;甲基三氯硅烷;甲基三氯化硅 TrichloroMethylsilane 75-79-6
甲基纤维素 Methylcellulose (AS);MC 9004-67-5