【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 豚鼠胚胎细胞;104C1培养
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 104C1细胞初期源于2/N株豚鼠的胎组织,后来细胞群体用苯并芘(Benzopyrene)处理7天诱导细胞产生恶性转化,连续克隆后获得传代细胞系。细胞染色体保留2倍体特征,但接种豚鼠产生实体肿瘤。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C32
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
产品名称 | 豚鼠胚胎细胞;104C1培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
三氯化铟 Indium chloride 10025-82-8
2,2,2-三氯乙基氯甲酸酯 2,2,2-Trichloroethyl chloroformate 17341-93-4
氯甲酸-4-硝基苄酯 4-Nitrobenzyl chloroformate 4457-32-3
氯甲酸苄酯 Benzyl chloroformate 501-53-1
氯甲酸异丙酯(约30%的,约2mol/L)(+4℃) Isopropyl chloroformate 108-23-6
氯甲酸正丙酯 Propyl chloroformate 109-61-5
氯酸钠;氯酸碱;氯酸曹达;白药钠 SodiuM chlorate 7775/9/9
* BenzalkoniuM Chloride 8001-54-5
氯亚铂酸钾 dipotassium tetrachloroplatinate 10025-99-7
氯亚钌酸铵 AMMONIUM AQUOPENTACHLORORUTHENATE(III) 68133-88-0
氯亚铱酸铵 AMMONIUM HEXACHLOROIRIDATE (III) HYDRATE 29796-57-4
氯乙基异氰酸酯 2-Chloroethyl isocyanate 1943-83-5
乙酰氯 ≥99.0% (T) Acetyl chloride 75-36-5人八聚体转录因(OTF2B)免疫试剂盒 Human octamer transcription factor 2B,OTF2B ELISA Kit
人八聚体转录因(OTF2A)免疫试剂盒 Human octamer transcription factor 2A,OTF2A ELISA Kit
人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)免疫试剂盒 human EchoVirus IgM,ECHO IgM ELISA Kit
人艾柯病毒IgG(ECHO IgG)免疫试剂盒 Human EchoVirus IgG,ECHO IgG ELISA Kit
人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)免疫试剂盒 Human iduronate sulfatase,IDS ELISA Kit
人癌症促凝素(CP)免疫试剂盒 Human Cancer Procoagulant,CP ELISA Kit
人癌抗原27-29(CA 27-29)免疫试剂盒 Human cancer antigen 27-29,CA 27-29 ELISA Kit