【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
产品名称 | 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163培养
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
人低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP-4)免疫试剂盒 Human LRP-4 ELISA Kit
人低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)免疫试剂盒 Human LRP-1 ELISA Kit
人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)免疫试剂盒 Human LDL-IC ELISA Kit
人低密度脂蛋白(LDL)免疫试剂盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA Kit
人低分质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)免疫试剂盒 Human LMP7/PSMB9 ELISA Kit
人登革热抗体IgM(DF-Ab IgM)免疫试剂盒 Human dengue fever antibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit
人登革热抗体(DF-Ab)免疫试剂盒 Human dengue fever antibody,DF-Ab ELISA Kit
人登革热(DF)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human DF IgG ELISA kit己二酸二异辛酯 Bis(2-ethylhexyl) adipate 103-23-1
己酸乙脂 NA
己糖激酶(-20℃) HEXOKINASE 9001-51-8
1-己烷磺酸钠 Sodium 1-hexanesulfonate 2832-45-3
加拿大树胶 CANADIAN BALSAM, NEUTRAL 8007-47-4
甲胺,水溶液40% METHYLAMINE 74-89-5
(易制毒) Toluene 108-88-3
Tolylene-2,4-diisocyanate 584-84-9
对甲苯磺酸,一水合物 p-Toluenesulfonic acid monohydrate 6192-52-5
-4-磺酸钠 Sodium p-toluenesulfonate 657-84-1
-4-磺酰胺 p-Toluenesulfonamide 70-55-3
-4-磺酰氯 Tosyl chloride 98-59-9