兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
00417 人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 60，HSP-60 ELISA Kit 96T/48T
00418 人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 90，HSP-90 ELISA Kit 96T/48T
00419 人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 70，HSP-70 ELISA Kit 96T/48T
00420 人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 40，HSP-40 ELISA Kit 96T/48T
00421 人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 20，HSP-20 ELISA Kit 96T/48T
00422 人肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒 Human Myosin，MYS ELISA Kit 96T/48T
00423 人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 Human C-Reactive Protein，CRP ELISA Kit 96T/48T
00424 人醛固酮(ALD)ELISA试剂盒 human aldosterone，ALD ELISA Kit 96T/48T
00425 人肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒 Human Myoglobin，MYO/MB ELISA Kit 96T/48T
00426 人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human cardiac troponin Ⅰ，cTn-ⅠELISA Kit 96T/48T
00427 人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 Human Angiogenin，ANG ELISA Kit 96T/48T
00428 人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 Human angiotension Ⅱ，ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
00429 人组织相容性2-K1-K 区(H2-K1)ELISA试剂盒 human Histocompatibility 2-K1-K region，H2-K1 ELISA Kit 96T/48T
00430 人甘露糖(MN)ELISA试剂盒 Human Mannose，MN ELISA Kit 96T/48T
00431 人甘露糖受体(MR)ELISA试剂盒 Human mannose receptor，MR ELISA Kit 96T/48T
00432 人2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)ELISA试剂盒 Human 2，3-Disphosphoglycerate，2，3-DPG ELISA Kit 96T/48T
00433 人β萘酚(β-Nph)ELISA试剂盒 Human Beta-naphthol，β-Nph ELISA Kit 96T/48T
00434 人凝聚素(CLU)ELISA试剂盒 Human clusterin，CLU ELISA Kit 96T/48T
00435 人二磷酸腺苷(ADP)ELISA试剂盒 Human Adenosine diphosphate，ADP ELISA Kit 96T/48T
00436 人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 Human 5-hydroxyindolacetic acid，5-HIAA ELISA Kit 96T/48T
00437 人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA试剂盒 Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid，12-HETE ELISA Kit 96T/48T
00438 人羟*(Hyp)ELISA试剂盒 Human hydroxyproline，Hyp ELISA Kit 96T/48T
00439 人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 Human nitric oxide，NO ELISA Kit 96T/48T
00440 人*(VC)ELISA试剂盒 Human Vitamin C，VC ELISA Kit 96T/48T
00441 人*6(VB6)ELISA试剂盒 Human Vitamin B6，VB6 ELISA Kit 96T/48T
00442 人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒 Human soluble P-selectin，sP-selectin ELISA Kit 96T/48T
00443 人基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1，TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
00444 人*(VD)ELISA试剂盒 Human Vitamin D，VD ELISA Kit 96T/48T
00445 人*1(VK1)ELISA试剂盒 Human Vitamin K1，VK1 ELISA Kit 96T/48T
00446 人*12(VB12)ELISA试剂盒 Human Vitamin B12，VB12 ELISA Kit 96T/48T
00447 人*3(VD3)ELISA试剂盒 Human Vitamin D3，VD3 ELISA Kit 96T/48T
00448 人*2(VD2)ELISA试剂盒 Human Vitamin D2，VD2 ELISA Kit 96T/48T
00449 人*(VE)ELISA试剂盒 Human Vitamin E，VE EELISA Kit 96T/48T
00450 人*(VA)ELISA试剂盒 Human Vitamin A，VA ELISA Kit 96T/48T
00451 人钙联蛋白(CNX)ELISA试剂盒 Human calnexin，CNX ELISA Kit 96T/48T
00452 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒 Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone，MIS/AMH ELISA Kit 96T/48T
00453 人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒 Human Fetuin A，FETU-A ELISA Kit 96T/48T
00454 人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒 Human placental protein，PP ELISA Kit 96T/48T
00455 人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒 Human anti-rubella virus IgG antibody，anti-RV IgG ELISA Kit 96T/48T
00456 人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒 Human anti-Epstein-Barr virus antibody，EBV ELISA Kit 96T/48T
00457 人孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒 Human progesterone receptor，PGR ELISA Kit 96T/48T
00458 人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒 Human basic fetoprotein，BFP ELISA Kit 96T/48T
00459 人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RV IgM)ELISA试剂盒 Human anti-rubella virus IgM antibody，anti-RV IgM ELISA Kit 96T/48T
00460 人催产素(OT)ELISA试剂盒 Human oxytocin，OT ELISA Kit 96T/48T
00461 人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 Human Endometrium Antibody，EMAb ELISA Kit 96T/48T
00462 人抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒 Human anti-sperm antibody，AsAb ELISA Kit 96T/48T
00463 人妊娠疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒 Human Herpes Gestation，HG ELISA Kit 96T/48T
00464 人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒 Human placenta growth factor，PLGF ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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