兔子*酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子*酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
9116 嗜铬蛋白A(CHGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chromogranin A (CHGA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9117 毒蕈碱型*受体M2(CHRM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 2 (CHRM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9118 缓激肽(BK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bradykinin (BK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9119 纤维蛋白原β(FGβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen Beta (FGb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9120 松弛肽(RLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Relaxin (RLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9121 TGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9122 激素脱落酸(ABA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Abscisic Acid (ABA) 48T/96T General
9123 胎盘碱性磷酸酶(ALPP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9124 接触蛋白关联蛋白样蛋白4(CNTNAP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin Associated Protein Like Protein 4 (CNTNAP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9125 糖抗原50(CA50)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbohydrate Antigen 50 (CA50) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9126 突触核蛋白α(SNCα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9127 神经细胞黏附分子(NCAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9128 抗补体1q抗体(Anti-C1q)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Complement 1q Antibody (Anti-C1q) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9129 胃泌素(GT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gastrin (GT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9130 毒蕈碱型*受体M4(CHRM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 4 (CHRM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9131 MAX基因关联蛋白A(MgA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for MAX Gene Associated Protein (MgA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9132 细胞毒性T-淋巴细胞关联抗原4(CTLA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4 (CTLA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9133 角蛋白18(KRT18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9134 细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9135 周期素依赖性激酶4(CDK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9136 杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9137 毒蕈碱型*受体M5(CHRM5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 5 (CHRM5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9138 纤溶酶原(Plg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plasminogen (Plg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9139 纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinopeptide A (FPA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9140 酰化刺激蛋白(ASP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acylation Stimulating Protein (ASP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9141 角蛋白19(KRT19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 19 (KRT19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9142 角蛋白20(KRT20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 20 (KRT20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9143 Kruppel样因子4(KLF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9144 ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter A1 (ABCA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9145 利钾尿肽(KP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kaliuretic Peptide (KP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9146 心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle And Heart (FABP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9147 TGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9148 胸腺表达趋化因子(TECK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thymus Expressed Chemokine (TECK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9149 雄激素受体(AR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Androgen Receptor (AR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9150 TGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9151 血管抑素(ANG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiostatin (ANG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9152 延伸蛋白A(ELOA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elongin A (ELOA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9153 基质金属蛋白酶26(MMP26)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9154 26S-蛋白酶体(26S-PSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 26S-Proteasome (26S-PSM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9155 *脱羧酶2(GAD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Decarboxylase 2, Acid (GAD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9156 Smad同源物7(Smad7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7) 48T/96T Mus musculus兔子*酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 (Mouse)
9157 接触蛋白3(CNTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 3 (CNTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子*酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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