兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
9033 二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Diamine Oxidase (DAO) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9034 表面活性物质关联蛋白B(SPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9035 表面活性物质关联蛋白C(SPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein C (SPC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9036 二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Diamine Oxidase (DAO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9037 淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphocyte Function Associated Antigen 1 Alpha (LFA1a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9038 防御素α1(DEFα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Alpha 1, Neutrophil (DEFa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9039 血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9040 脂质运载蛋白1(LCN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipocalin 1 (LCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9041 半胱氨酰白三烯受体2(CYSLTR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 2 (CYSLTR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9042 Toll样受体4(TLR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9043 天冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aspartate Aminotransferase (AST) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9044 天冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aspartate Aminotransferase (AST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9045 转录激活因子5(ATF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activating Transcription Factor 5 (ATF5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9046 白介素17F(IL17F)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17F (IL17F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9047 血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet Activating Factor Acetylhydrolase 2 (PAFAH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9048 血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 (VEGFR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9049 Salusinβ蛋白(Salusinβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Salusin Beta 48T/96T Homo sapiens (Human)
9050 O-6-甲基*DNA甲基转移酶(MGMT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for O-6-Methylguanine DNA Methyltransferase (MGMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9051 白介素28B(IL28B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 28B (IL28B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9052 白介素29(IL29)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 29 (IL29) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9053 脑型肌酸激酶(CKB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9054 白介素4受体(IL4R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 Receptor (IL4R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9055 分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor (SLPI) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9056 载脂蛋白C4(APOC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein C4 (APOC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9057 胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
9058 CD14分子(CD14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 14 (CD14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9059 脑啡肽(ENK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Enkephalin (ENK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9060 甲胎蛋白异质体3(αFPL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 3 (aFPL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9061 金属硫蛋白1(MT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9062 *酶(Arg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arginase (Arg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9063 巨噬细胞刺激蛋白(MSP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Macrophage Stimulating Protein (MSP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9064 Opiorphin蛋白(OPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Opiorphin (OPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9065 着丝粒蛋白B(CENPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Centromere Protein B (CENPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9066 脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I (DNASE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9067 小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1 (SNRPD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9068 抗核糖核蛋白抗体(Anti-RNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Ribonucleoprotein Antibody (Anti-RNP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9069 抗Jo1抗体(Anti-Jo1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Jo1 Antibody 48T/96T Homo sapiens (Human)
9070 抗Scl-70抗体(Anti-Scl70)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Scl 70 Antibody 48T/96T Homo sapiens (Human)
9071 抗肝肾微粒体抗体(Anti-LKMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Liver/Kidney Microsomal Antibody (Anti-LKMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9072 丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 5 (MAP4K5) 48T/96T Homo sapiens兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 (Human)
9073 环胍氨酸肽(CCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclical Citrullinated Peptide (CCP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9074 造骨细胞钙黏蛋白(CDHOB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin, Osteoblast (CDHOB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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