兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
00097 人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 Human brain natriuretic peptide，BNP ELISA Kit 96T/48T
00098 人细胞角蛋白20(CK20)ELISA试剂盒 Human cytokeratin 20，CK20 ELISA Kit 96T/48T
00099 人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP ELISA Kit 96T/48T
00100 人细胞角蛋白13(CK-13)ELISA试剂盒 Human cytokeratin 13，CK-13 ELISA Kit 96T/48T
00101 人细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒 Human cytokeratin 17，CK-17 ELISA Kit 96T/48T
00102 人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA试剂盒 human B-cell leukemia/lymphoma 3，Bcl3 ELISA Kit 96T/48T
00103 人P27蛋白(P27)ELISA试剂盒 Human P27 protein ELISA Kit 96T/48T
00104 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒 Human mucin-5 subtype B，MUC5B ELISA Kit 96T/48T
00105 人Dickkopf 1(DKK1)ELISA试剂盒 Human Dickkopf 1，DKK1 ELISA Kit 96T/48T
00106 人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒 Human CA724 ELISA Kit 96T/48T
00107 人转移因子(TF)ELISA试剂盒 Human Transfer factor，TF ELISA Kit 96T/48T
00108 人结肠癌抗原(CCA)ELISA试剂盒 Human Colon Cancer Antigen，CCA ELISA Kit 96T/48T
00109 人细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒 Human cytokeratin 18，CK-18 ELISA Kit 96T/48T
00110 人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒 Human soluble transferrin receptor，sTfR ELISA Kit 96T/48T
00111 人金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 Human Metallothionein，MT ELISA Kit 96T/48T
00112 人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA试剂盒 Human apoptosis protease activating factor-1，Apaf-1 ELISA Kit 96T/48T
00113 人中期因子(MK)ELISA试剂盒 Human Midkine，MK ELISA Kit 96T/48T
00114 人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 Human B-cell leukemia/lymphoma 2，Bcl-2 ELISA Kit 96T/48T
00115 人低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒 Human hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
00116 人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒 Human transferrin receptor，TFR ELISA Kit 96T/48T
00117 人P53(P53)ELISA试剂盒 Human p53/tumor protein， p53/TP53 ELISA Kit 96T/48T
00118 人内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 Human Endostatin，ES ELISA Kit 96T/48T
00119 人铁蛋白(FE)ELISA试剂盒 Human ferritin，FE ELISA Kit 96T/48T
00120 人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 Human tissue inhibitor of metal protease 1，TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
00121 人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)ELISA试剂盒 Human myelin basic protein autoantibody，MBP ELISA Kit 96T/48T
00122 人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒 Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit 96T/48T
00123 人肺癌标志物ELISA试剂盒 human lung cancer Marker ELISA Kit 96T/48T
00124 人胃癌标志物ELISA试剂盒 human gastric carcinoma Marker ELISA Kit 96T/48T
00125 人胰腺癌标志物CA242ELISA试剂盒 Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 96T/48T
00126 人胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒 Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 96T/48T
00127 人乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒 Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 96T/48T
00128 人卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒 Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 96T/48T
00129 人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 Human Alpha-fetoprotein，AFP ELISA Kit 96T/48T
00130 人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit 96T/48T
00131 人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit 96T/48T
00132 人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2，TIMP-2 ELISA Kit 96T/48T
00133 人抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 Human Oncostatin-M，OSM ELISA Kit 96T/48T
00134 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒 Human Surfactant Protein A，SP-A ELISA Kit 96T/48T
00135 人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒 Human Pulmonary surfatcant-associated protein A，SP-A ELISA Kit 96T/48T
00136 人转*酶2C多肽(TGM2)ELISA试剂盒 human tranGSlutaminase 2C polypeptide，TGM2 ELISA Kit 96T/48T
00137 人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒 Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide，PⅠNP ELISA Kit兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒 96T/48T
00138 人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒 Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen，ⅠCTP ELISA Kit 96T/48T
00139 人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human C-opeptide of type Ⅰ collagen，CTX-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
00140 人肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 Human hepatic lipase，HL ELISA Kit 96T/48T
00141 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒 Human Heparanase，HPA ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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