兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
00001 人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 Human Interleukin-2 receptor，IL-2R ELISA Kit 96T/48T
00002 人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 Human Interferon β，IFN-β/IFNB ELISA Kit 96T/48T
00003 人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 Human transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T
00004 人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 Human leukotriene D4，LT-D4 ELISA Kit 96T/48T
00005 人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒 Human growth hormone relasing factor，GH-RF ELISA Kit 96T/48T
00006 人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒 Human macrophage chemotatic factor，MCF ELISA Kit 96T/48T
00007 人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒 Human Interferon α/βReceptor，IFN-α/βR ELISA Kit 96T/48T
00008 人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒 Human B cell growth protein，BCGF ELISA Kit 96T/48T
00009 人B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒 Human B cell differetiation factor，BCDF ELISA Kit 96T/48T
00010 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 Human soluble adhesion molecules，Sam ELISA Kit 96T/48T
00011 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 Human Perforin/Pore-forming protein，PF/PFP ELISA Kit 96T/48T
00012 人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒 Human pleiotrophin，PTN ELISA Kit 96T/48T
00013 人淋巴细胞因子ELISA试剂盒 Human lymphocyte factor ELISA Kit 96T/48T
00014 人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒 Human Cobra venom neuronal protective factor，CVNPF ELISA Kit 96T/48T
00015 人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒 Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor，sTNFαR ELISA Kit 96T/48T
00016 人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒 Human soluble cytokine receptor，sCKR ELISA Kit 96T/48T
00017 人集落刺激因子(CSF)ELISA试剂盒 Human colony-stimulating factor，CSF ELISA Kit 96T/48T
00018 人凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒 Human apoptosis inducing factor，AIF ELISA Kit 96T/48T
00019 人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒 Human Placenta Cadherin，P-cad ELISA Kit 96T/48T
00020 人角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒 Human Keratinocyte Growth Factor，KGF ELISA Kit 96T/48T
00021 人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒 Human Plaet-Derived Growth Factor-BB，PDGF-BB ELISA Kit 96T/48T
00022 人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒 Human lymphotactin，Lptn/LTN ELISA Kit 96T/48T
00023 人α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 Human Interferon α，IFN-α ELISA Kit 96T/48T
00024 人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒 human Interleukin 27，IL-27 ELISA Kit 96T/48T
00025 人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒 Human Interleukin 23，IL-23 ELISA Kit 96T/48T
00026 人白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 Human Interleukin 1，IL-1 ELISA Kit 96T/48T
00027 人白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 Human Interleukin 17，IL-17 ELISA Kit 96T/48T
00028 人白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒 Human Interleukin 1β，IL-1β ELISA Kit 96T/48T
00029 人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 Human Epidermal growth factor，EGF ELISA Kit 96T/48T
00030 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒 Human basic fibroblast growth factor，bFGF ELISA Kit 96T/48T
00031 人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒 Human soluble E-selectin，sE-selectin ELISA Kit 96T/48T
00032 人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1，sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
00033 人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 Human intercellular adhesion molecule 2，ICAM-2 ELISA Kit 96T/48T
00034 人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 Human intercellular adhesion molecule 3，ICAM-3 ELISA Kit 96T/48T
00035 人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 Human Interleukin 18，IL-18 ELISA Kit 96T/48T
00036 人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒 Human mucosae associated epithelia chemokine，MEC ELISA Kit 96T/48T
00037 人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒 Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B，VEGF-B ELISA Kit 96T/48T
00038 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 Human Vascular Endothelial cell Growth Factor，VEGF ELISA Kit 96T/48T
00039 人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 Human Vascuolar cell adhesion molecule 1，VCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
00040 人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒 Human Tumor necrosis factor β，TNF-β ELISA Kit 96T/48T
00041 人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 Human Tumor necrosis factor α，TNF-α ELISA Kit 96T/48T
00042 人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 Human Transforming Growth factor β1，TGF-β1 ELISA Kit 96T/48T
00043 人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 Human transforming growth factor α，TGF-α ELISA Kit 96T/48T
00044 人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒 Human Stem cell factor/mast cell growth factor，SCF/MGF ELISA Kit 96T/48T
00045 人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand，sCD40L ELISA Kit 96T/48T
00046 人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒 Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand，sCD30L ELISA Kit 96T/48T
00047 人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒 Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISA Kit 96T/48T
00048 人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒 Human Plaet-Derived Growth兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒 Factor AB，PDGF-AB ELISA Kit 96T/48T
00049 人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒 Human Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α，PDGFsR-α ELISA Kit 96T/48T
00050 人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒 Human Macrophage-Derived Chemokine，MDC ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 兔粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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