荧光素标记微管蛋白α抗体IgG动物体内单抗的方法迄今为止,通常情况下均采用动物体内单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然*BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而用SPF级小鼠。荧光素标记微管蛋白α抗体IgGA、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液体石蜡。c. 处于对数生*的杂交瘤细胞。
B、方法:a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后,每天观察小鼠腹水产生情况,如腹部明显膨大,以手触摸时,皮肤有紧张感,即可用16号针头采集腹水,一般可连续采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 将腹水离心(2000r/min 5分钟),除去细胞成分和其他的沉淀物,收集上清, 荧光素标记微管蛋白α抗体IgG公司产品详情请参阅有关详细论述链接点击:
Anti-MCP-1 (monocyte chemotactic protein1)??巨噬细胞趋化蛋白-1抗体
Anti-M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors)??巨噬细胞克隆刺激因子抗体
Anti-MDM2 (urine double minute 2)??双微体2癌基因抗体
Anti-Megsin/SER—PINB7??*(或半*)蛋白酶抑制剂B7抗体
Anti-Melan-A/MART-1??黑色素瘤相关抗原/黑色素-A抗体
Anti-Metal ion transporter??拟南介金属离子转运蛋白抗体
Anti-Mfn1 (Mitofusin1)??线粒体融合蛋白1抗体
Anti-MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase)??O6甲基*DNA甲基转移酶抗体
anti-MT(metallothionein)??金属基质硫蛋白抗体
anti-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(NT)??层粘连蛋白受体1抗体(N端)
anti-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT)??层粘连蛋白受体1抗体(C端)
Anti-MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A)??一种细胞应激分子抗体
Anti-Midnolin isoform Protein 1??中脑核仁蛋白1抗体
Anti-Midnolin isoform Protein 2??中脑核仁蛋白2抗体
(2) 体外培养单抗的方法总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室zui常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。荧光素标记微管蛋白α抗体IgG
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