鸡肾小管上皮细胞

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

鸡肾小管上皮分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性维D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分；近端小管可分为直部和曲部，曲部也称为近曲小管，位于皮质迷路内，于肾小体附近高度蟠曲；远端小管曲部也称为远曲小管，位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞，肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏疾病的一项重要技术，目前该分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能：①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非营养物质进入终尿；③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子，通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应；④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原，这说明肾小管上皮细胞参与肾免疫损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深，肾小管上皮细胞（RTECs）在其中的作用日益被人们重视。因此，提供良好的肾小管上皮细胞模型，在肾小管间质疾病的发病机制和治疗药物筛选的研究中是非常重要的

方法简介：

公司实验室分离的鸡肾小管上皮采用筛网过滤、胶原酶消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的鸡肾小管上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠白介素2(IL-2)试剂盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

Mouse 6 galactose sulfatase (Gal-6S) ELISA Kit 小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)试剂盒

ELISA 小鼠可溶性白介素-2受体(mouse sIL-2R)  进口分装

CLIAKitforIL-6(HumanIerleukin6)ELISAKIT人白介素6

通用型肌酐(CREATININE)酶连续反应比色法定量试剂盒50次

ELISAKitICA大鼠胰岛细胞抗体

突触核蛋白   英文名称：   Human α Synucleinα   英文缩写：   α-SYN

血清铁蛋白   英文名称：   ferritin in serum   英文缩写：   SF

肺表面活性物质相关蛋白A   英文名称：   Pulmonary surfacta associated protein type A   英文缩写：   SP-A

β-谷甾醇   英文名称：   β Sitosterol   英文缩写：   β Sitosterol

DZANK1蛋白抗体

小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)试剂盒

HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISAKit 人异(iso-Hyd)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCoisol试剂盒人(Coisol)试剂盒规格：96T/48T

组织C-KIT激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanproteinkinaseB,PKBELISAKit人蛋白激酶B(PKB)试剂盒规格：96T/48T

亲环蛋白（亲环素）40抗体

NTRK2重组狗 TrkB / NTRK2 蛋白 (Fc 标签) Protein

Nestin 巢蛋白(神经上皮干细胞蛋白 0.5mgNestin 巢蛋白(神经上皮干细胞蛋白)(抗原)

SEMA6A重组人 Semaphorin 6A / SEMA6A 蛋白 Protein

IFNA8 Protein Human 重组人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白

鸡肾小管上皮细胞Nestin 巢蛋白(神经上皮干细胞蛋白 0.5mgNestin 巢蛋白(神经上皮干细胞蛋白)(抗原)

IFNA8 Protein Human 重组人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

NTRK2重组狗 TrkB / NTRK2 蛋白 (Fc 标签) Protein

IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白

SEMA6A重组人 Semaphorin 6A / SEMA6A 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取