小鼠脾脏单核细胞

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

小鼠脾脏单核分离自脾脏组织；脾脏是机体大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处，与9－11肋相对，长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻，前方有胃，后方与左肾、左肾上腺毗邻，下端与结肠脾沟相邻，地柔软的网状内皮细胞器官。单核细胞（monocytes）是体积大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形性，如卵圆形、肾形(a)、马蹄形(b)、不规则形（c）等，常有折叠感(c)；染色质呈疏松网状，着色较浅。胞质较多，嗜碱性，但因含大量细小的嗜天青颗粒而染成灰蓝色，颗粒含过氧化物酶。单核细胞是血液中大的血细胞。目前认为它是巨噬细胞的前身，具有明显的变形运动，能吞噬、清除受伤、衰老的细胞及其碎片。单核细胞还参与免疫反应，在吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细胞，诱导淋巴细胞的特异性免性反应。单核细胞也是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力。淋巴细胞则为具有特异性免疫功能的细胞。T淋巴细胞主要参与细胞免疫反应而B淋巴细胞参与体液免疫反应。

方法简介：

实验室分离的小鼠脾脏单核采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠脾脏单核经CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：巨噬细胞样

传代特性：不增殖；不传代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠脾脏单核体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)试剂盒 ，英文名： HDL2 ELISA Kit

Porcine ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 猪白介素1β (IL-1β)试剂盒

埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMHB(RatMethemoglobin,MHB)ELISAKit大鼠高铁血红蛋白

体液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量试剂盒50次

ELISAKitPCK牛0酸烯醇式同酸羧激酶

心血管活性多肽   英文名称：   Apelin   英文缩写：   AP

转录因子AP-1   英文名称：   anscription Factors AP-1   英文缩写：   AP-1

0酸化AKT蛋白   英文名称：   phosphorylation AKT   英文缩写：   p-AKT

晚期糖基化终末产物   英文名称：   advanced glycosylation end products   英文缩写：   AGEs

1号染色体开放阅读框191抗体

B淋巴细胞成熟因子（CD269）抗体

OSM重组小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

白介素3(IL3)重组蛋白 Recombinant Interleukin 3 (IL3)

SRI重组人 SRI / Sorcin 蛋白 Protein

CD164 Protein Human 重组人 CD164 / Endolyn 蛋白

CLEC5A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

CD164 Protein Human 重组人 CD164 / Endolyn 蛋白

FGFR1重组小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 Protein

CD5 Protein Rat 重组大鼠 CD5 蛋白 (Fc 标签)

ADM重组人 ADM / Adrenomedullin 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠脾脏单核细胞小鼠胰岛素原(PI)ELISA pcr检测试剂盒

Human soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒

HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 人前胶原C端肽酶(PCP)pcr检测试剂盒分装

CLIAKitfor26SPSM(Human26Sproteasome)ELISAKit人26S蛋白酶体

饮料甘素(dulcin)含量薄层色谱法定性试剂盒20次

MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit小鼠黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒规格：96T/48T

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取