小鼠羊膜上皮细胞

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

小鼠羊膜上皮分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠羊膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠羊膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠乳酸脱氢酶A(LDHA)试剂盒 ，英文名： LDHA ELISA Kit

Mouse angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)试剂盒

RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit 大鼠绒毛膜β(β-CG)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGzms-B(HumangranzymesB)ELISAKit人颗粒酶B

细胞同酸激酶(PK)总活性比色法定量试剂盒20次

RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒规格：96T/48T

兔内皮素-1(rabbit ET-1)   作用：   ELISA 

兔降解产物(rabbit FDP)   作用：   ELISA 

兔促卵泡素(rabbit FSH)   作用：   ELISA 

兔碱性成纤维生长因子(rabbit b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA

ADP核糖基化样因子8B抗体

小鼠NOD样受体-2(NOD-2)试剂盒 96T/48T

Rat hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 大鼠透明质酸(HA)试剂盒

HumanCoisolELISAKit 人(Coisol)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCollagenaoaibody,CLA试剂盒人抗胶原蛋白抗体(CLA)试剂盒规格：96T/48T

组织3-羟-3-甲戊二酰(HMG-COA)还原酶比色法定量试剂盒20次

Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit人重组激活基因2(RAG-2)试剂盒规格：96T/48T

凋亡相关蛋白4抗体

DLL4重组小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 Protein

CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉细胞蛋白(Clara细胞分泌蛋白)抗原

NGFR重组人 NGFR/ P75 蛋白 Protein

HK3 Protein Human 重组人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 标签)

IL17RA Protein Rat 重组大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 标签)

小鼠羊膜上皮细胞CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉细胞蛋白(Clara细胞分泌蛋白)抗原

HK3 Protein Human 重组人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 标签)

DLL4重组小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 Protein

IL17RA Protein Rat 重组大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 标签)

NGFR重组人 NGFR/ P75 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取