小鼠脐带间充质干细胞

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

小鼠脐带间充质干分离自脐带；脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构。原来是由羊膜包卷着卵黄囊和尿膜的柄状伸长部而形成的。脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。当卵黄囊及其血管退化，脐动脉和脐静脉就发达起来，在这些间隙中可以看到疏松的胶状的间充质。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿来的废物运送至胎盘，脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。后由子宫静脉将来自胎儿的代谢废物运走，某种激素和抗体等也通过脐带从母体移交给胎儿。脐带中含有大量的干细胞，干细胞是生命的种子，它会分化成机体的各种细胞，结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体；这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。间充质干细胞（MSC）是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下，可分化为多种造血细胞以外的组织细胞，并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用；目前，多用于风湿免疫疾病的治疗。间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子，促进造血干细胞（HSC）的增殖与分化。MSCs还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用，可减轻移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相关并发症。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠脐带间充质干采用组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠脐带间充质干经CD29、CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠白介素20(IL-20)试剂盒 ，英文名： IL-20 ELISA Kit

Mouse cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA Kit 小鼠半胱蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)试剂盒

ELISA 小鼠白介素-2(mouse IL-2)  进口分装

CLIAKitforIL-7(MouseIerleukin-7)ELISAkit小鼠白介素7

通用型肌酐(CREATININE)化学比色法定量试剂盒50次

ELISAKitAmylin大鼠胰淀素

豚鼠钩端IgG(Lebtospira)试剂盒   96T/48T

豚鼠肝细胞生长因子(HGF)试剂盒   96T/48T

豚鼠端粒酶(TE)试剂盒   96T/48T

豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)试剂盒   96T/48T

DNA结合蛋白C抗体

小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human glycoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 人糖蛋白130(gp130)试剂盒

HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanB-CellLinkerProtein,BLNK试剂盒人B细胞连接蛋白(BLNK)试剂盒规格：96T/48T

植物种子高质化叶绿体分离试剂盒10次

Huma-cellspecificGTPase,TgtpELISAKit人T细胞特异性鸟苷三0酸酶(Tgtp)试剂盒规格：96T/48T

气味结合蛋白抗体

EPHB4重组人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

热休克蛋白β2(HSPβ2)重组蛋白 Recombinant Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2)

PKLR重组人 PKLR / PKRL 蛋白 Protein

FLRT3 Protein Human 重组人 FLRT3 蛋白

NA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (N294S mutation) (高活性)

小鼠脐带间充质干细胞热休克蛋白β2(HSPβ2)重组蛋白 Recombinant Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2)

FLRT3 Protein Human 重组人 FLRT3 蛋白

EPHB4重组人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

NA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (N294S mutation) (高活性)

PKLR重组人 PKLR / PKRL 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取