细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介:
小鼠虹膜色素上皮分离自眼球虹膜组织;虹膜是眼睛构造的一部分,属于眼球中层,位于血管膜的前部;在睫状体前方虹膜,中心有一圆形开口,称为瞳孔,犹如相机当中可调整大小的光圈,内含色素决定眼睛的颜色。日间光线较为强烈时,虹膜会收蹜,只使一小束光线穿透瞳孔,进入眼睛;当进入黑暗环境中,虹膜就会往后退缩,使瞳孔变大,让更多的光线进入眼睛,多数的脊椎动物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮细胞(IPE)是虹膜重要结构组成细胞之一,位于虹膜组织的后面,和视网膜色素上皮细胞(RPE)同样起源于神经外胚叶层,可能具有相似的生物学功能,因此对IPE的研究将为防治因RPE结构或功能异常而导致的眼底病提供新思路。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠虹膜色素上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠虹膜色素上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 眼球 | 产品货号 | YS-01X7380 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
公司正在出售的产品:
大鼠心营养素样细胞因子1(CLCF1)试剂盒 ,英文名: CLCF1 ELISA Kit
Mouse heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒
MouseFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 小鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanai-macrophageaibodyELISAKit人抗巨噬细胞抗体
细胞FLT3激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitGRH大鼠促生长激素释放激素
小鼠GRO(mouse GRO) 作用: ELISA
小鼠神经胶质细胞衍化营养因子(mouse GDNF) 作用: ELISA
小鼠生长因子(mouse GH) 作用: ELISA
小鼠心肌转录因子3(mouse GATA3) 作用: ELISA
生发中心激酶样激酶抗体
小鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human growth hormone releasing factor (GH-RF) ELISA Kit 人生长激素释放因子(GH-RF)试剂盒
Humahymopein,TP-5ELISAKit 人五肽(TP-5)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-rubellavirusIgGaibody,ai-RVIgG试剂盒人抗风疹病毒IgG抗体(ai-RVIgG)试剂盒规格:96T/48T
植物细胞周期G1期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次
Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISAKit人抗肾小管基底膜抗体(TBM)试剂盒规格:96T/48T
AF488标记人CD16单克隆抗体
SMAD3重组小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
高迁移率族蛋白1(HMG1)重组蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
SHPK重组人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重组人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
CD200R1L Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD200RLa 蛋白
小鼠虹膜色素上皮细胞高迁移率族蛋白1(HMG1)重组蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
FAM45A Protein Human 重组人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
SMAD3重组小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CD200R1L Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD200RLa 蛋白
SHPK重组人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取