细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介:
小鼠肺血管平滑肌分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能:①细胞表面表达介质(ICAM-1和VCAM-1)参与血管壁炎症反应;②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化:①平滑肌增生易致肺动脉高压;②先天性肺动脉狭窄;③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素,新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应,并且与血管疾病的发展及稳定性有关。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠肺血管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠肺血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 肺组织 | 产品货号 | YS-01X7000 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
公司正在出售的产品:
大鼠白介素6(IL-6)试剂盒 ,英文名: IL-6 ELISA Kit
Mouse ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 小鼠白介素1β (IL-1β)试剂盒
ELISA 小鼠组胺(mouse HIS) 进口分装
CLIAKitforINSELISAKit大鼠胰岛素
通用型副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性试剂盒20次
ELISAKitApo-E大鼠载脂蛋白E
小鼠白介素1β(IL-1β)试剂盒 96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)试剂盒 96T/48T
小鼠白介素18(IL-18)试剂盒 96T/48T
小鼠白介素17(IL-17)试剂盒 96T/48T
6号染色体开放阅读框97抗体
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human neuron specific enolase (NSE) ELISA Kit 人神经特异性烯醇化酶(NSE)试剂盒
humanBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 人β内啡肽(β-EP)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-Mi2-aibody试剂盒人抗Mi2抗体(ai-Mi2-Ab)试剂盒规格:96T/48T
植物培养细胞DNA损伤彗星荧光试剂盒20次
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit人型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒规格:96T/48T
磷酸化突触后密度蛋白93抗体
IL7R重组大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (Fc 标签) Protein
FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase 0.5mgFAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的丝/苏激酶抗原
OMG重组人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-420, His 标签) Protein
ERBB3 Protein Human 重组人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 标签)
EFNA3 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
小鼠肺血管平滑肌细胞FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase 0.5mgFAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的丝/苏激酶抗原
ERBB3 Protein Human 重组人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 标签)
IL7R重组大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (Fc 标签) Protein
EFNA3 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
OMG重组人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-420, His 标签) Protein
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取